典型文献
铜绿假单胞菌oprD基因DNA疫苗和重组亚单位疫苗的免疫效果研究
文献摘要：
为探究铜绿假单胞菌oprD基因DNA疫苗和重组亚单位疫苗的免疫效果,本研究经PCR扩增铜绿假单胞菌oprD基因,将其克隆于真核表达载体pcaggs-HA中,构建重组质粒pOPRD.同时将oprD基因克隆于原核表达载体pET32a中构建重组质粒,随后将该重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中进行蛋白表达并纯化后制备该基因的重组亚单位疫苗.分别以pOPRD质粒和重组亚单位疫苗免疫BALB/c小鼠,同时设置pOPRD初免-重组亚单位疫苗加强免疫组、灭活疫苗(本研究室制备)免疫组、铜绿假单胞菌外膜蛋白(本研究室制备)免疫组以及pcaggs-HA空载体对照组和PBS对照组.免疫后采用间接ELISA测定小鼠血清抗体水平,MTT法检测小鼠脾淋巴细胞增殖水平,双抗夹心ELISA测定脾淋巴细胞分泌的IFN-γ和IL-4的水平.结果显示各疫苗均可诱导免疫小鼠产生较高水平的血清抗体,初免-加强免疫组小鼠脾细胞的增殖指数(SI)值及小鼠脾淋巴细胞分泌的IFN-γ和IL-4含量显著高于DNA疫苗组和重组亚单位疫苗组(P＜0.05).三免两周后以铜绿假单胞菌强毒株CAV0792对各组小鼠进行攻毒试验,测定攻毒后各组小鼠的保护率,结果显示DNA疫苗组、重组亚单位疫苗组、初免-加强免疫组、外膜蛋白疫苗组和灭活疫苗组的保护率分别为53.3％、60％、73.3％、80％和93.3％.本研究首次证实以铜绿假单胞菌oprD基因制备的DNA疫苗和重组亚单位疫苗均可诱导小鼠产生免疫应答,并为其提供对铜绿假单胞菌感染的免疫保护,且两者以初免-加强免疫的方式诱导的免疫应答水平更高、保护效果更好.本研究为铜绿假单胞菌DNA疫苗和重组亚单位疫苗的研究奠定了基础.
文献关键词：
铜绿假单胞菌;oprD基因;DNA疫苗;重组亚单位疫苗;初免-加强免疫
中图分类号：
作者姓名：
宫强;翟文汉;李雅静;田佳雨
作者机构：
河南科技大学河南省食品微生物工程技术研究中心,河南 洛阳 471023
文献出处：
引用格式：
[1]宫强;翟文汉;李雅静;田佳雨-.铜绿假单胞菌oprD基因DNA疫苗和重组亚单位疫苗的免疫效果研究)[J].中国预防兽医学报,2022(08):868-874
A类：
oprD,pcaggs,pOPRD,CAV0792
B类：
重组亚单位疫苗,免疫效果,真核表达载体,HA,重组质粒,基因克隆,原核表达载体,pET32a,转入,大肠杆菌,BL21,DE3,感受态,疫苗免疫,BALB,加强免疫,灭活疫苗,研究室,外膜蛋白,空载,PBS,小鼠血清,血清抗体水平,MTT,小鼠脾淋巴细胞,淋巴细胞增殖,双抗,夹心,IFN,脾细胞,细胞的增殖,增殖指数,SI,三免,两周,毒株,攻毒试验,保护率,蛋白疫苗,铜绿假单胞菌感染,免疫保护,免疫应答水平,保护效果
AB值：
0.187725
机标中图分类号，由域田数据科技根据网络公开资料自动分析生成，仅供学习研究参考。
