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单核细胞增生李斯特菌SigB蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备
文献摘要：
为制备单核细胞增生李斯特菌SigB蛋白及其多克隆抗体,采用PCR方法扩增参考菌株10403S的sigB基因片段,并克隆至原核表达载体pET-30a构建重组质粒,测序验证后转化至大肠杆菌Rosseta(DE3)感受态细胞进行原核表达,利用Ni-NTA亲和层析纯化SigB蛋白,通过免疫兔体获得多克隆抗体.结果表明:成功构建SigB重组质粒,并诱导表达出可溶性SigB蛋白,其相对分子质量约30 ku,纯化后的SigB蛋白质量浓度约为1.5 mg∕mL,获得的多克隆抗体效价为1:51200.经Western-blot验证,该多克隆抗体能特异性检测SigB蛋白,表现出良好的抗体特异性.本研究可为探究单增李斯特菌的应激调控机制奠定基础.
文献关键词：
单核细胞增生李斯特菌;SigB蛋白;原核表达;多克隆抗体
中图分类号：
作者姓名：
夏叶;孙莹慧;李春华;缪德年
作者机构：
上海市农业科学院畜牧兽医研究所,上海201106
文献出处：
引用格式：
[1]夏叶;孙莹慧;李春华;缪德年-.单核细胞增生李斯特菌SigB蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备)[J].上海农业学报,2022(01):1-5
A类：
SigB,Rosseta
B类：
单核细胞增生李斯特菌,多克隆抗体,白及,参考菌株,10403S,sigB,原核表达载体,pET,30a,重组质粒,大肠杆菌,DE3,感受态,NTA,亲和层析,层析纯化,诱导表达,相对分子质量,ku,抗体效价,blot,特异性检测,抗体特异性,单增李斯特菌,调控机制
AB值：
0.214844
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