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典型文献
苦荞查尔酮合成酶多克隆抗体制备及组织表达分析
文献摘要:
苦荞查尔酮合成酶(FtCHS)是黄酮类化合物合成过程中的限速酶之一,在苦荞黄酮类次生代谢物合成中起到重要作用.以苦荞种子灌浆期cDNA为模板,采用RT-PCR方法克隆获得FtCHS基因,通过生物信息学分析确定FtCHS的截短抗原基因序列(TrCHS).再通过原核表达、亲和层析等方法制备并纯化TrCHS抗原,以纯化的抗原免疫大白兔获得TrCHS的多克隆抗体,利用半定量RT-PCR、Western blotting方法分析苦荞不同器官FtCHS的表达情况.结果表明,成功克隆FtCHS基因开放阅读框(ORF)大小为1 182 bp,共编码393个氨基酸,通过原核表达获得TrCHS抗原的分子质量约34.71 ku,所制备的多克隆抗体具有较高的特异性,FtCHS基因在苦荞叶子、种子的表达量明显最高.
文献关键词:
苦荞;查尔酮合成酶;原核表达;抗体制备;组织表达
作者姓名:
李蒙;陈鹏
作者机构:
西安文理学院生物与环境工程学院,西安 710065;西北农林科技大学生命科学学院,陕西杨凌 712100
文献出处:
引用格式:
[1]李蒙;陈鹏-.苦荞查尔酮合成酶多克隆抗体制备及组织表达分析)[J].西北农业学报,2022(11):1491-1498
A类:
FtCHS,TrCHS
B类:
查尔酮合成酶,多克隆抗体制备,组织表达分析,黄酮类化合物,合成过程,限速酶,苦荞黄酮,次生代谢物,灌浆期,cDNA,生物信息学分析,原基,基因序列,原核表达,亲和层析,大白兔,半定量,blotting,不同器官,开放阅读框,ORF,bp,分子质量,ku,叶子
AB值:
0.216302
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