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鹅星状病毒刺突蛋白单克隆抗体的制备与鉴定
文献摘要：
为了制备鹅星状病毒(goose astrovirus,GAstV)刺突(Spike)蛋白的单克隆抗体,并对获得的单克隆抗体的生物学特性进行鉴定,将大肠杆菌表达的截短Spike蛋白免疫BALB/c小鼠,经细胞融合和单克隆抗体的筛选来获得阳性杂交瘤细胞,并进一步利用免疫印迹和间接免疫荧光技术进行单抗的鉴定;采用ELISA技术进行单克隆抗体亚型、抗体效价的测定;同时根据GAstV XX株Spike蛋白序列合成重叠的多肽库进行单抗识别的抗原表位鉴定.共获得3株阳性杂交瘤细胞,分别命名为1A5、2B4、12E6;免疫印迹和间接免疫荧光实验显示3株单克隆抗体均与Spike蛋白具有良好的免疫反应,其中2B4、12E6可与GAstV发生反应;亚型鉴定结果显示单抗12E6、2B4为IgG2b亚类,单抗1A5为IgG2a亚类;轻链均为κ链;敏感性结果显示,抗体效价都在1:51200以上;抗原表位的鉴定结果表明单抗1A5识别的抗原表位为(EP16)ELRNRLNIADGDYVI,单抗2B4识别的抗原表位为(EP21)AGDSNPGETFQNFKM.本研究成功制备了针对GAstV Spike蛋白的单克隆抗体,并鉴定出2个新的抗原表位,为建立快速、简便的GAstV检测方法奠定了基础.
文献关键词：
鹅星状病毒;刺突蛋白;单克隆抗体;抗原表位
中图分类号：
作者姓名：
卢清侠;李伟;金前跃;郭振华;冯丽丽;邢云瑞;柴书军;邢广旭;张改平
作者机构：
河南省农业科学院动物免疫学重点实验室,河南郑州450002;河南农业大学生命科学学院,河南郑州4500023;河南省农业科学院农业经济与信息研究所,河南郑州450002
文献出处：
引用格式：
[1]卢清侠;李伟;金前跃;郭振华;冯丽丽;邢云瑞;柴书军;邢广旭;张改平-.鹅星状病毒刺突蛋白单克隆抗体的制备与鉴定)[J].江苏农业科学,2022(22):159-165
A类：
1A5,12E6,EP16,ELRNRLNIADGDYVI,EP21,AGDSNPGETFQNFKM
B类：
鹅星状病毒,毒刺,刺突蛋白,单克隆抗体的制备,goose,astrovirus,GAstV,Spike,生物学特性,大肠杆菌表达,BALB,细胞融合,杂交瘤细胞,免疫印迹,间接免疫荧光,免疫荧光技术,单抗,抗体亚型,抗体效价,XX,多肽,抗原表位鉴定,共获,2B4,免疫反应,IgG2b,亚类,IgG2a,轻链
AB值：
0.206984
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