典型文献
华东葡萄抗逆相关基因VpSBP16原核表达及功能初步分析
文献摘要：
SBP-box基因在植物响应逆境胁迫中起着非常重要的作用,通过制备华东葡萄(V.pseudoreticulata)转录因子VpSBP16基因抗血清,为深入探究葡萄抗逆相关基因VpSBP16的功能试验提供基础.将已构建的pGEX-VpSBP16原核表达载体转入大肠杆菌中,利用IPTG诱导表达的蛋白作为抗原注射新西兰兔,从而获得VpSBP16基因抗血清,利用Western blot检测手段,以所获得的VpSBP16基因抗血清作为一抗检测毛葡萄'商-24'叶、茎、花序、卷须和果实不同发育时期的VpSBP16蛋白表达情况.结果表明,原核表达载体pGEX-VpSBP16在大肠杆菌菌株DE3中高效表达,Western blot检测出与预期结果一致的分子量约为87kD的GST-VpSBP16融合蛋白.在新西兰兔的背部及腹股沟注射纯化后的目的融合蛋白获得了免疫-抗原反应良的多克隆抗血清.提取葡萄总蛋白后检测到VpSBP16蛋白表达量在花序中含量最低,而在果实发育的绿果期表达量较高.大肠杆菌表达系统中,pGEX-VpSBP16融合蛋白可以在27℃、0.6 mmol/L IPTG诱导条件下获得高表达.因此,笔者研究制备的多克隆抗血清具备效价高、特异性强的特点.VpSBP16基因不仅增强植物非生物胁迫的抗性,也可能会影响葡萄花发育和葡萄果实成熟,参与调节葡萄从营养生长到生殖生长的转变.
文献关键词：
葡萄;VpSBP16;抗血清;蛋白表达
中图分类号：
作者姓名：
柴生樾;王浩;王西平
作者机构：
西北农林科技大学园艺学院,陕西杨凌 712100;旱区作物逆境生物学国家重点实验室,西北农林科技大学,陕西杨凌 712100
文献出处：
引用格式：
[1]柴生樾;王浩;王西平-.华东葡萄抗逆相关基因VpSBP16原核表达及功能初步分析)[J].陕西农业科学,2022(03):78-84
A类：
VpSBP16,pseudoreticulata,87kD
B类：
华东,抗逆,初步分析,box,逆境胁迫,pGEX,原核表达载体,转入,IPTG,诱导表达,原注,新西兰兔,blot,检测手段,花序,卷须,不同发育时期,DE3,高效表达,预期结果,分子量,GST,融合蛋白,背部,腹股沟,多克隆抗血清,总蛋白,果实发育,大肠杆菌表达,表达系统,诱导条件,效价,价高,非生物胁迫,葡萄花,花发育,葡萄果实,果实成熟,营养生长,生殖生长
AB值：
0.269298
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