典型文献
猪表皮生长因子的原核表达及纯化
文献摘要：
[目的]:提高重组猪表皮生长因子(pEGF)的表达量和纯化量,为后续研究pEGF对仔猪生长发育的影响奠定基础.[方法]:将人工合成的pEGF基因克隆至pEGF4T-1载体,转化至大肠杆菌Rossetta(DE3)中,得到重组菌株Rossetta(DE3)-pGEX-pEGF,IPTG诱导表达,进行表达条件的优化,用GST-tag亲和层析纯化方法进行纯化.[结果]:pEGF基因大小为159 bp,融合表达蛋白分子量为32kDa,最佳诱导表达条件为IPTG浓度0.01mmol/L、诱导温度15℃和诱导时间24h.流穿液和洗涤液中目的蛋白含量极少,洗脱液得到了高纯度的GST-pEGF融合蛋白,纯化较为成功.[结论]:成功构建了 pEGF表达菌株,得到了最优的诱导表达条件和最优的纯化工艺,为pEGF相关产品的开发以及应用奠定了基础.
文献关键词：
猪表皮生长因子;诱导表达;GST标签;蛋白纯化;条件优化;融合表达
中图分类号：
作者姓名：
刘庭;汤慧;唐青海;刘莎;薛姣雄;吴广艳;马洁;赵婷芳;唐斯萍
作者机构：
衡阳师范学院生命科学与环境学院\南岳山区生物资源保护与利用湖南省重点实验室\动物微生物新型检测技术及生物制剂衡阳市重点实验室,湖南衡阳421008
文献出处：
引用格式：
[1]刘庭;汤慧;唐青海;刘莎;薛姣雄;吴广艳;马洁;赵婷芳;唐斯萍-.猪表皮生长因子的原核表达及纯化)[J].湖南畜牧兽医,2022(02):45-50
A类：
猪表皮生长因子,pEGF,pEGF4T,Rossetta,32kDa
B类：
原核表达,仔猪,人工合成,基因克隆,大肠杆菌,DE3,重组菌株,pGEX,IPTG,诱导表达,GST,tag,亲和层析,层析纯化,纯化方法,bp,融合表达,分子量,01mmol,诱导时间,24h,洗涤液,目的蛋白,蛋白含量,极少,洗脱液,高纯度,融合蛋白,纯化工艺,蛋白纯化,条件优化
AB值：
0.321204
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