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鸡毒支原体p24蛋白的原核表达及膜定位研究
文献摘要:
为研究p24蛋白在鸡毒支原体中的定位,对p24基因序列进行分析,PCR扩增p24基因并构建原核表达载体,表达p24蛋白,制备多克隆兔抗血清,ELISA测定其效价,提取鸡毒支原体总蛋白、膜蛋白、胞浆蛋白通过Western blot进行亚细胞定位.结果显示:p24基因高度保守,全长576 bp,编码192个氨基酸;成功构建表达载体pCold-p24,经转化、诱导表达后获得重组蛋白rp24,大小约为35kDa;ELISA检测兔抗rp24血清效价为1:12800,说明rp24蛋白具有很好的免疫原性;Western blot显示rp24蛋白在膜蛋白免疫印迹条带较亮,在胞浆蛋白中条带弱,证明p24主要分布在膜表面,是鸡毒支原体的膜蛋白.试验结果为后续基因工程疫苗研制、诊断试剂盒研发、致病机理研究奠定基础.
文献关键词:
鸡毒支原体;p24基因;生物信息学;原核表达;膜定位
中图分类号:
作者姓名:
宋春;杨美;王柏林;周怡;成虹松;陈常秀;程振涛
作者机构:
贵州大学动物科学学院,贵州贵阳 550025;临沂大学农林科学学院,山东临沂 276005;贵州省动物疫病与兽医公共卫生重点实验室,贵州贵阳 550025
文献出处:
引用格式:
[1]宋春;杨美;王柏林;周怡;成虹松;陈常秀;程振涛-.鸡毒支原体p24蛋白的原核表达及膜定位研究)[J].畜牧与兽医,2022(05):64-67
A类:
rp24,35kDa
B类:
鸡毒支原体,膜定位,定位研究,基因序列,原核表达载体,多克,兔抗血清,效价,体总,总蛋白,膜蛋白,blot,亚细胞定位,全长,bp,建表,pCold,诱导表达,重组蛋白,免疫原性,蛋白免疫印迹,条带,中条,基因工程疫苗,疫苗研制,诊断试剂,试剂盒,致病机理
AB值:
0.267537
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