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典型文献
基于猪丁型冠状病毒重组M蛋白间接ELISA抗体检测方法的建立与应用
文献摘要:
猪丁型冠状病毒(porcine deltacoronavirus,PDCoV)是近年新发现的一种猪肠道病原体,主要感染仔猪并引起仔猪腹泻甚至死亡,针对该病建立快速、准确的血清学检测方法尤为重要.本研究以PDCoVHNZK-04毒株为模板扩增M基因并将其克隆至原核表达载体pET-32a中,构建了重组质粒pET-32a-PDCoV-M.将阳性重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,并用IPTG诱导M蛋白表达,SDS-PAGE显示目的蛋白的分子量约为41kDa;Western blot结果显示该蛋白可以与PDCoV阳性血清特异性结合.以纯化后的M蛋白作为靶抗原,建立了一种间接ELISA检测方法.用该方法对其他猪常见病毒,包括猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪圆环病毒2型(PCV2)的阳性血清进行检测,结果均为阴性;批内重复试验和批间重复试验变异系数均小于10%,表明建立的PDCoV间接ELISA检测方法具有良好的特异性和重复性,可以用于PDCoV感染的临床检测和诊断.
文献关键词:
猪丁型冠状病毒;M蛋白;间接ELISA
作者姓名:
张艺璇;任豪杰;闫瑞杰;曾权;李倩倩;魏战勇
作者机构:
河南农业大学动物医学院,河南郑州 450002;河南省动物性食品安全重点实验室,河南郑州 450002
文献出处:
引用格式:
[1]张艺璇;任豪杰;闫瑞杰;曾权;李倩倩;魏战勇-.基于猪丁型冠状病毒重组M蛋白间接ELISA抗体检测方法的建立与应用)[J].畜牧与兽医,2022(01):84-88
A类:
PDCoVHNZK,41kDa
B类:
猪丁型冠状病毒,病毒重组,抗体检测,建立与应用,porcine,deltacoronavirus,新发现,种猪,猪肠,病原体,仔猪腹泻,至死,血清学检测,毒株,原核表达载体,pET,32a,重组质粒,大肠杆菌,BL21,DE3,IPTG,SDS,PAGE,目的蛋白,分子量,blot,阳性血清,特异性结合,靶抗原,种间,常见病,猪流行性腹泻病毒,PEDV,猪传染性胃肠炎病毒,TGEV,猪伪狂犬病病毒,PRV,猪繁殖与呼吸综合征病毒,PRRSV,猪圆环病毒,PCV2,复试,临床检测
AB值:
0.338823
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