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典型文献
猪圆环病毒3型河北株Cap蛋白的原核表达与鉴定
文献摘要:
为了制备猪圆环病毒3型cap蛋白,依据NCBI发表的PCV3全基因序列(MK105924)设计了一对特异性引物,通过PCR方法获取PCV3-CAP蛋白基因,将纯化的PCV3-CAP蛋白基因插入到pET-32a(+)质粒中构建重组质粒pET-32a(+)-PCV3-Cap,将构建成功的质粒转化到表达菌株BL21(DE3),经1mmol/mL的IPTGF 37℃诱导表达后,利用SDS-PAGE检测重组蛋白的表达情况,利用Western blot方法分别检测重组蛋白的免疫原性,对影响重组蛋白表达的IPTG浓度和诱导时间进行分析.结果表明:PCR产物通过琼脂糖凝胶电泳检测发现条带位置正确,重组质粒pET-32a(+)-PCV3-Cap测序正确,含有重组质粒pET-32a(+)-PCV3-Cap的表达菌株BL21(DE3)在诱导表达后,经SDS-PAGE检测证明有重组蛋白表达,重组蛋白主要以WesTM全自动蛋白表达分析系统结果表明该重组蛋白与PCV3多克隆抗体发生特异性反应,说明成功制备了PCV3F Cap重组蛋白.
文献关键词:
猪圆环病毒3F型;Cap蛋白;原核表达
作者姓名:
王星;李杰峰;张宁;郑丽丽;姜晔;马玉忠;杨威;翟向和
作者机构:
河北农业大学 动物医学院,河北 保定 071001;河北省畜牧兽医研究所,河北 保定 071001;河北大学附属医院,河北 保定 071001
引用格式:
[1]王星;李杰峰;张宁;郑丽丽;姜晔;马玉忠;杨威;翟向和-.猪圆环病毒3型河北株Cap蛋白的原核表达与鉴定)[J].畜牧兽医科技信息,2022(01):37-40
A类:
MK105924,IPTGF,WesTM,PCV3F
B类:
猪圆环病毒,Cap,原核表达,cap,NCBI,全基因序列,特异性引物,CAP,基因插入,pET,32a,重组质粒,BL21,DE3,1mmol,诱导表达,SDS,PAGE,blot,免疫原性,重组蛋白表达,诱导时间,琼脂糖凝胶电泳,条带,动蛋白,表达分析,多克隆抗体
AB值:
0.207078
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