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鹅细小病毒VP2蛋白单克隆抗体的研制及鉴定
文献摘要：
为了制备鹅细小病毒(GPV)VP2蛋白的特异性单克隆抗体,将VP2基因克隆至大肠杆菌原核表达载体pET28a(+),构建了 pET28a-VP2原核表达质粒,经过诱导表达并纯化获得了 VP2蛋白.将纯化蛋白免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备了 3株可稳定分泌与GPV VP2蛋白结合的单克隆抗体杂交瘤细胞株,分别命名为:F5-B7、C4-4和B9-C5.抗体分型结果显示,3株单克隆抗体轻链均为κ链,F5-B7和C4-4重链亚类为IgG2b,B9-C5重链亚类为IgGI.以VP2蛋白为包被抗原,采用间接ELISA方法检测表明,F5-B7和C4-4两个单抗效价可达1 ∶240 000,B9-C5单抗为1 ∶20 000.间接免疫荧光和免疫印迹试验表明,这3株抗体皆能与GPV发生特异性反应.本研究为鹅细小病毒VP2蛋白表位鉴定、病毒和VP2蛋白结构功能研究、鹅细小病毒诊断试剂的开发及基因工程抗体的研究等奠定了基础.
文献关键词：
鹅细小病毒;VP2蛋白;单克隆抗体
中图分类号：
作者姓名：
陈柳;倪征;华炯钢;叶伟成;云涛;朱寅初;张存
作者机构：
浙江省农业科学院畜牧兽医研究所,浙江杭州 310021
文献出处：
引用格式：
[1]陈柳;倪征;华炯钢;叶伟成;云涛;朱寅初;张存-.鹅细小病毒VP2蛋白单克隆抗体的研制及鉴定)[J].畜牧与兽医,2022(09):85-89
A类：
IgGI
B类：
鹅细小病毒,VP2,单克隆抗体,GPV,基因克隆,大肠杆菌,原核表达载体,pET28a,质粒,诱导表达,BALB,杂交瘤技术,蛋白结合,杂交瘤细胞株,F5,B7,C4,B9,C5,抗体分型,轻链,亚类,IgG2b,包被抗原,单抗,效价,间接免疫荧光,免疫印迹试验,表位鉴定,蛋白结构,结构功能,功能研究,诊断试剂,基因工程
AB值：
0.266319
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