典型文献
山羊痘病毒晚转录因子VLTF-3基因的原核表达及结构预测
文献摘要：
研究旨在了解羊痘病毒晚转录因子VLTF-3结构特征和生物学特征.试验采用PCR方法扩增羊痘病毒Thx毒株晚转录因子VLTF-3基因,将其插入质粒PET-42b中建立原核表达载体,经菌液PCR和测序方法鉴定.阳性质粒转入大肠杆菌BL21中,用0.1 mmoL/L的IPTG诱导其表达蛋白,并通过SDS-PAGE和Western blot技术进行蛋白的表达的检测与鉴别.基因检测结果利用DNAMAN、DNAStar和Mega等软件进行生物信息学分析和建立遗传进化树,对其编码的氨基酸序列在线进行二级结构分析和高级结构的预测,并对其信号肽、跨膜特性、亲水性、磷酸化位点和抗原性等生物学特性进行分析.结果显示:试验成功扩增了 VLTF-3的基因组,并建立了原核表达载体pET-42b-VLTF-3.测序结果表明,GTPV-VLTF-3基因全长681 bp;与参照株GTPV-Pellor毒株的同源性达99％,保守性较强,编码227aa,与理论相符.遗传进化树分析结果显示,该基因与皮肤疙瘩病遗传距离最近.SDS-PAGE检测结果显示,该蛋白质大量表现在上清中;Western blot结果显示,该蛋白与His标签进行了融合表达.VLTF-3蛋白不具有信号肽,为非分泌型蛋白,共有22个磷酸化位点,α螺旋、无规则卷曲、延伸链和β转角分别占34.80％、35.68％、22.91％、6.61％,三级结构以α螺旋为主.研究表明,试验成功克隆了晚转录因子VLTF-3,并能够可溶性表达其蛋白,生物分析预测其高级结构α螺旋为主.
文献关键词：
山羊痘病毒;克隆;融合表达;VLTF-3基因
中图分类号：
作者姓名：
周正国;赵垚鑫;张汐;李有文
作者机构：
塔里木大学动物科学与技术学院新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技兵团重点实验室,新疆阿拉尔843300;塔里木大学动物科学与技术学院新疆生产建设兵团南疆动物疫病诊断与防控工程实验室,新疆阿拉尔843300
文献出处：
引用格式：
[1]周正国;赵垚鑫;张汐;李有文-.山羊痘病毒晚转录因子VLTF-3基因的原核表达及结构预测)[J].现代畜牧兽医,2022(12):1-6
A类：
VLTF,Thx,42b,Pellor,227aa
B类：
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AB值：
0.287875
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