典型文献
RT-qPCR分析拷贝数及mRNA转录水平对表达左聚糖蔗糖酶的影响
文献摘要：
采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)技术对重组毕赤酵母基因组中左聚糖蔗糖酶基因(SacB)的拷贝数及信使核糖核酸(mRNA)转录水平进行检测分析,并用3,5-二硝基水杨酸(DNS)法测定菌株不同诱导时间下左聚糖蔗糖酶水解活力.结果表明,在BMMY液体培养基中经甲醇诱导24 h时,样品转录水平皆达到最大值,此时多拷贝菌株转录水平(2.13)为单拷贝菌株(0.42)的5.1倍;左聚糖蔗糖酶活力在甲醇诱导24 h后均随诱导时间不断上升,多拷贝菌株酶活(13.96 U/mL)较单拷贝菌株(5.48 U/mL)提高1.5倍.重组毕赤酵母整合的左聚糖蔗糖酶基因在1～3个拷贝范围内,随着拷贝数增加,多拷贝菌株较单拷贝菌株的mRNA转录水平及相应的蛋白表达量均显著增加(P<0.05),说明毕赤酵母是表达基因SacB的良好宿主.
文献关键词：
实时荧光定量聚合酶链式反应;毕赤酵母;左聚糖蔗糖酶;拷贝数;转录水平
中图分类号：
作者姓名：
陈硕昌;仝秋平;郭晓磊;朱萍;蒙健宗;杨辉
作者机构：
广西大学 生命科学与技术学院,广西 南宁 530004;亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室,广西 南宁 530004;广西微生物与酶工程技术研究中心,广西 南宁 530004
文献出处：
引用格式：
[1]陈硕昌;仝秋平;郭晓磊;朱萍;蒙健宗;杨辉-.RT-qPCR分析拷贝数及mRNA转录水平对表达左聚糖蔗糖酶的影响)[J].中国酿造,2022(04):80-86
A类：
左聚糖蔗糖酶,BMMY
B类：
qPCR,拷贝数,转录水平,实时荧光定量聚合酶链式反应,毕赤酵母,酶基因,SacB,信使核糖核酸,检测分析,硝基,水杨酸,DNS,诱导时间,酶水解,液体培养基,甲醇诱导,多拷贝,酶活力,表达基因,宿主
AB值：
0.152559
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