典型文献
辣椒脉黄病毒P4蛋白多克隆抗体制备与应用
文献摘要：
[目的]辣椒脉黄病毒(Pepper vein yellows virus,PeVYV)属马铃薯卷叶病毒属(Polerovirus),生产上主要侵染辣椒,目前在我国呈现快速扩展态势,因此,亟需开展PeVYV致病性研究,为分析对辣椒的潜在威胁提供依据.以PeVYV编码运动蛋白P4为免疫源,制备多克隆抗体,建立PeVYV P4蛋白特异性检测方法,为PeVYV P4蛋白功能研究奠定基础.[方法]采用RT-PCR技术,从感染PeVYV辣椒cDNA中扩增获得片段大小为471 bp的PeVYV P4基因,并克隆到原核表达载体pDEST17,转化E.coli Rosetta中进行诱导表达,采用Ni-NTA柱层析纯化.以纯化P4蛋白作为抗原免疫新西兰白兔制备多克隆抗体.制备的多克隆抗体采用Western blotting检测.[结果]原核表达的PeVYV P4蛋白,SDS-PAGE表明纯化蛋白为一分子量约为25 kDa的单一条带.Western blotting检测表明,制备的多克隆抗体,特异性的结合P4蛋白.PeVYV侵染辣椒样本检测表明,制备的P4多克隆抗体能特异性检测PeVYV.[结论]制备的PeVYV P4多克隆抗体,可用于特异性检测PeVYV P4蛋白,为进一步深入研究P4蛋白的功能奠定基础.
文献关键词：
辣椒脉黄病毒;P4基因;原核表达;蛋白纯化;多克隆抗体
中图分类号：
作者姓名：
卜姗;罗香文;张德咏;张松柏;张宇;刘勇
作者机构：
湖南大学研究生院隆平分院,湖南 长沙 410125;湖南省农业科学院植物保护研究所,湖南 长沙 410125
文献出处：
引用格式：
[1]卜姗;罗香文;张德咏;张松柏;张宇;刘勇-.辣椒脉黄病毒P4蛋白多克隆抗体制备与应用)[J].福建农业学报,2022(01):74-78
A类：
辣椒脉黄病毒,PeVYV,Polerovirus,pDEST17
B类：
P4,多克隆抗体制备,制备与应用,Pepper,vein,yellows,马铃薯卷叶病毒,侵染,致病性,动蛋白,特异性检测,蛋白功能,功能研究,cDNA,bp,原核表达载体,coli,Rosetta,诱导表达,NTA,柱层析,层析纯化,新西兰白兔,blotting,SDS,PAGE,分子量,kDa,条带,蛋白纯化
AB值：
0.191947
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