典型文献
辣椒斑驳病毒CP蛋白多克隆抗体制备与应用
文献摘要：
[目的]辣椒斑驳病毒(Pepper mottle virus,PepMoV)是近年来生产上主要侵染辣椒的新发病毒之一,目前有在我国快速扩展的趋势,因此,亟需开展该病毒的特异性快速检测技术,为明确该病毒在我国辣椒主产区的分布、发生致害规律及机制等研究提供科学手段.本研究以PepMoV编码的外壳蛋白CP为免疫源,制备特异性多克隆抗体,建立PepMoV的特异性快速检测方法,为PepMoV的分布和发生致害规律等研究奠定基础.[方法]采用特异性RT-PCR技术,从感染PepMoV辣椒的cDNA中扩增获得片段大小为822 bp的CP基因,并克隆到原核表达载体pET28α,转化E coli DH5α中进行诱导表达,采用Ni-NTA柱层析纯化.以纯化的重组CP蛋白作为抗原免疫新西兰白兔制备特异性多克隆抗体.制备的多克隆抗体采用ID-ELISA和Western blotting检测.[结果]获得原核表达的PepMoV重组CP蛋白,SDS-PAGE结果表明纯化蛋白为分子量约为37 kDa的单一条带.Western blotting和ID-ELISA检测结果表明,制备的多克隆抗体特异性高,仅识别PepMoV CP蛋白,不识别寄主蛋白和其他选择的马铃薯Y病毒;田间样本检测结果表明,PepMoV在湖南和贵州辣椒上的检出率为20.00％和43.33％.[结论]基于PepMoV CP蛋白特异性多克隆抗体建立的PepMoV快速检测方法,可为进一步深入研究该病毒在我国的分布和发生规律提供科学手段,也为该病毒CP蛋白的功能研究奠定基础.
文献关键词：
辣椒斑驳病毒;CP基因;多克隆抗体;间接ELISA;快速检测
中图分类号：
作者姓名：
王鑫;叶倩;吕小园;田培洁;张松柏;张宇;张德咏;罗香文
作者机构：
湖南大学生物学院隆平分院,湖南 长沙 410125;湖南省农业科学院植物保护研究所,湖南 长沙 410125;长沙海关技术中心,湖南 长沙 410300
文献出处：
引用格式：
[1]王鑫;叶倩;吕小园;田培洁;张松柏;张宇;张德咏;罗香文-.辣椒斑驳病毒CP蛋白多克隆抗体制备与应用)[J].福建农业学报,2022(12):1595-1600
A类：
辣椒斑驳病毒,PepMoV
B类：
CP,多克隆抗体制备,制备与应用,Pepper,mottle,virus,来生,侵染,快速检测技术,主产区,致害,外壳蛋白,快速检测方法,cDNA,bp,原核表达载体,pET28,coli,DH5,诱导表达,NTA,柱层析,层析纯化,新西兰白兔,ID,blotting,SDS,PAGE,分子量,kDa,条带,抗体特异性,不识,寄主,马铃薯,田间,南和,发生规律,功能研究
AB值：
0.2445
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