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典型文献
鲤Pdcd6ip蛋白真核表达载体的构建及抗病毒功能研究
文献摘要:
为进一步研究程序性细胞死亡6互作蛋白Pdcd6ip(Programmed cell death 6-interacting protein)分子功能,探讨其表达对鲤春病毒血症病毒(Spring viraemia of carp virus,SVCV)增殖的影响,研究通过逆转录-聚合酶链式反应扩增得到两端带有Nhe I和EcoR I酶切位点的pdcd6ip编码片段,并将其克隆至真核表达载体pCI-neo上,构建了真核表达质粒pCI-pdcd6ip.获得的过表达质粒转染至EPC细胞后进行RT-qPCR和western blot检测Pdcd6ip的表达情况,并利用CCK-8法检测其对细胞增殖的影响.细胞转染后24h进行SVCV感染,检测Pdcd6ip过表达对SVCV增殖的影响.结果显示,Pdcd6ip蛋白真核重组质粒能够在EPC细胞中大量表达,转染后72h细胞活性较对照组无显著差异.同时,免疫荧光、RT-qPCR和western blot检测结果均显示,Pdcd6ip蛋白过表达后,SVCV M蛋白mRNA水平和蛋白表达水平较对照组显著下降,表明Pdcd6ip过表达显著抑制了SVCV的增殖.研究为抗SVCV药物的研发提供了新的研究基础和设计思路.
文献关键词:
鲤春病毒血症病毒;Pdcd6ip蛋白;过表达质粒;细胞活性;抗病毒;鲤
作者姓名:
邵玲;张明辉;彭军辉
作者机构:
上海市水产研究所, 上海市水产技术推广站, 上海, 200433
文献出处:
引用格式:
[1]邵玲;张明辉;彭军辉-.鲤Pdcd6ip蛋白真核表达载体的构建及抗病毒功能研究)[J].水生生物学报,2022(04):529-536
A类:
Pdcd6ip,viraemia,pdcd6ip
B类:
真核表达载体,抗病毒,功能研究,程序性细胞死亡,互作蛋白,Programmed,cell,death,interacting,protein,鲤春病毒血症病毒,Spring,carp,virus,SVCV,逆转录,聚合酶链式反应,Nhe,EcoR,酶切位点,至真,pCI,neo,真核表达质粒,过表达质粒,质粒转染,EPC,qPCR,western,blot,CCK,细胞转染,24h,重组质粒,72h,细胞活性,免疫荧光,蛋白表达水平
AB值:
0.303465
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