典型文献
bta-miR-377靶向调控牛下丘脑CART基因表达的研究
文献摘要：
[目的]分析bta-miR-377与牛卵泡发育的关键调控因子可卡因-苯丙胺调节转录肽(cocaine and amphetamine regulated transcript peptide,CART)间的靶标关系,明确 bta-miR-377 对牛 CART 表达影响的作用机制.[方法]本研究通过生物信息学手段预测bta-miR-377与牛CART基因mRNA的结合位点,并对miR-377在不同物种间的序列保守性进行分析;利用双荧光素酶报告基因法验证bta-miR-377与CART基因的靶标关系;选择3头健康西门塔尔母牛,采集其下丘脑组织,分析bta-miR-377和CART基因在牛下丘脑中的内源表达情况;以PC12和293T细胞为模型进行细胞功能验证,利用实时荧光定量PCR和Western blotting检测分别转染bta-miR-377 mimics和NC mimics后的PC12细胞中CART基因mRNA和293T细胞中CART蛋白表达丰度变化.[结果]bta-miR-377在CART 3'-UTR上存在靶向结合位点,并能极显著下调CART 3'-UTR野生型重组双荧光质粒的相对荧光活性(P＜0.01),且结合位点序列在多个物种中高度保守;在牛与大鼠间,miR-377种子区序列保守性较低;bta-miR-377和CART在牛下丘脑中均有表达;过表达bta-miR-377 mimics能够极显著下调CART基因mRNA的表达(P＜0.01),显著下调CART蛋白的表达(P＜0.05),bta-miR-377与CART的表达存在负相关关系.[结论]bta-miR-377和CART在牛下丘脑组织中均有表达,bta-miR-377能够通过与CART 3'-UTR特异性结合抑制PC12细胞中CART mRNA的表达.
文献关键词：
牛;下丘脑;CART;bta-miR-377
中图分类号：
作者姓名：
任静;郝琴琴;成俊丽;朱芷葳;许冬梅;贾雪纯;李鹏飞
作者机构：
山西农业大学生命科学学院,太谷030801
文献出处：
引用格式：
[1]任静;郝琴琴;成俊丽;朱芷葳;许冬梅;贾雪纯;李鹏飞-.bta-miR-377靶向调控牛下丘脑CART基因表达的研究)[J].中国畜牧兽医,2022(09):3301-3309
A类：
B类：
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AB值：
0.257371
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