典型文献
三角帆蚌IGF2基因的亚细胞定位及重组蛋白促体外细胞活性分析
文献摘要:
胰岛素样生长因子2(insulin-like growth factors 2,IGF2)在多种细胞生长、分化和合成代谢的调节中发挥重要的调控作用.本研究成功构建了淡水珍珠贝三角帆蚌IGF2的重组质粒pEGFP-IGF2和pET32a-IGF2,通过pEGFP-IGF2-细胞转染,表明该蛋白定位在细胞质与细胞核中.将pET32a-IGF2转化到BL21(DE3)中进行蛋白诱导表达,成功得到其原核表达载体,SDS-PAGE检测显示,在约25ku处有一条清晰的条带,符合目的条带大小(26.27 ku),且主要表达于上清液中.为研究重组蛋白IGF2对三角帆蚌细胞活性的作用,通过CCK8细胞活性测定,进一步探讨了添加不同质量浓度重组目的蛋白(0、2.5、5.0、7.5、12.5、17.5、22.5μg/mL)培养的三角帆蚌外套膜细胞增殖活性.结果显示,三角帆蚌IGF2重组蛋白能显著促进三角帆蚌外套膜细胞的增殖活性(P<0.05),且在其质量浓度为12.5μg/mL时对三角帆蚌外套膜细胞的促生长效果最佳,这为促进三角帆蚌外套膜细胞传代、细胞系建立奠定了基础,也为下一步探究IGF2在贝类中的功能提供依据.
文献关键词:
三角帆蚌;IGF2;亚细胞定位;重组蛋白;细胞培养;生物活性
中图分类号:
作者姓名:
李雪男;冯上乐;王贺;申晓雅;陈一格;白志毅;李文娟
作者机构:
上海海洋大学水产科学国家级实验教学示范中心,上海 201306;上海海洋大学农业农村部淡水水产种质资源重点实验室,上海 201306
文献出处:
引用格式:
[1]李雪男;冯上乐;王贺;申晓雅;陈一格;白志毅;李文娟-.三角帆蚌IGF2基因的亚细胞定位及重组蛋白促体外细胞活性分析)[J].上海海洋大学学报,2022(06):1335-1341
A类:
25ku
B类:
三角帆蚌,IGF2,亚细胞定位,重组蛋白,体外细胞,细胞活性,活性分析,胰岛素样生长因子,insulin,like,growth,factors,细胞生长,合成代谢,淡水珍珠,珍珠贝,重组质粒,pEGFP,pET32a,细胞转染,蛋白定位,细胞质,细胞核,BL21,DE3,蛋白诱导表达,原核表达载体,SDS,PAGE,条带,带大,上清液,CCK8,活性测定,目的蛋白,外套膜,膜细胞,细胞增殖活性,细胞的增殖,促生长效果,传代,细胞系,贝类,细胞培养
AB值:
0.284576
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