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猪CD205分子CysR-FN Ⅱ截短基因的克隆表达及应用
文献摘要：
为克隆表达编码猪CD205分子的CysR-FNⅡ截短基因片段,并验证其生物学活性,提取了猪淋巴组织总RNA,并合成cDNA,利用PCR方法扩增编码猪CD205分子的CysR-FNⅡ截短基因,构建pET-32a-CysR-FNⅡ原核重组表达质粒,转化至大肠杆菌BL21,分别进行诱导表达与蛋白质纯化,利用制备的目的蛋白免疫小鼠获得多克隆抗体,经间接免疫荧光试验和流式细胞分析鉴定.SDS-PAGE与Western Blot鉴定结果显示,目的蛋白以可溶性形式表达,大小约4.0×104,与理论值一致.一次免疫后14 d抗体效价达1:3200.间接免疫荧光试验和流式分析结果显示,获得的多克隆抗体可与猪骨髓来源树突状细胞发生特异性结合.说明该重组表达蛋白质具有相应的生物学活性,可用于猪CD205抗原靶向研究.
文献关键词：
猪;CD205;CysR-FN Ⅱ截短基因;原核表达;生物学活性
中图分类号：
作者姓名：
高文昊;杜露平;侯立婷;于晓明;陈瑾;冯秀丽;郑其升;程海卫
作者机构：
江苏省农业科学院动物免疫工程研究所/国家兽用生物制品工程技术研究中心/江苏省食品质量与安全重点实验室,江苏南京 210014;南京农业大学动物医学院,江苏 南京 210095;江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心,江苏 扬州 225009
文献出处：
引用格式：
[1]高文昊;杜露平;侯立婷;于晓明;陈瑾;冯秀丽;郑其升;程海卫-.猪CD205分子CysR-FN Ⅱ截短基因的克隆表达及应用)[J].江苏农业学报,2022(05):1272-1277
A类：
CD205,CysR
B类：
FN,克隆表达,生物学活性,淋巴组织,并合,cDNA,增编,pET,32a,重组表达,质粒,大肠杆菌,BL21,诱导表达,蛋白质纯化,目的蛋白,多克隆抗体,间接免疫荧光试验,流式细胞分析,分析鉴定,SDS,PAGE,Blot,理论值,抗体效价,流式分析,猪骨,骨髓来源树突状细胞,特异性结合,原核表达
AB值：
0.301541
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