典型文献
跨越式滚环等温扩增技术结合CRISPR/Cas12a定量检测海产品中的副溶血性弧菌
文献摘要：
将CRISPR/Cas12a系统与跨越式滚环等温扩增技术(saltatory rolling circle amplification,SRCA)相结合,建立一种快速、灵敏定量检测海产品中副溶血性弧菌(Vibrio parahemolyticus)的方法(SRCA-Cas12a).通过SRCA扩增靶标DNA,CRISPR/Cas12a系统识别靶标DNA并裂解单链报告探针,从而建立SRCA-Cas12a检测方法.分析该方法的特异性与灵敏度,并进行加标回收实验和实际样品检测.结果显示该方法可区分副溶血性弧菌和其他食源性致病菌,特异性良好.在最优检测体系下,建立了副溶血性弧菌菌液浓度的对数与荧光信号强度的线性关系,线性方程为y=1.847 2x+2.473 8(R2=0.986 6),检出限为3.6 CFU/mL(RSN=3).在人工污染样品中副溶血性弧菌的加标回收率为95.5％～104.4％.在实际样品检测中,该方法的敏感性为100.0％、特异性为95.2％、符合率为97.2％.本研究所建立的SRCA-Cas12a方法具有特异性好、检测限低的优点,为副溶血性弧菌的快速定量检测提供了一种新策略.
文献关键词：
CRISPR/Cas12a;跨越式滚环等温扩增;副溶血性弧菌;定量检测;海产品
中图分类号：
作者姓名：
董换哲;苑宁;张蕴哲;杨倩;卢鑫;郭威;张伟
作者机构：
河北农业大学食品科技学院,河北保定 071001;河北农业大学理工学院,河北沧州 061100;河北大学公共卫生学院,河北保定 071002;河北农业大学生命科学学院,河北保定 071001;河北省人畜共患病原微生物分析与防控重点实验室,河北保定 071001
文献出处：
引用格式：
[1]董换哲;苑宁;张蕴哲;杨倩;卢鑫;郭威;张伟-.跨越式滚环等温扩增技术结合CRISPR/Cas12a定量检测海产品中的副溶血性弧菌)[J].食品科学,2022(14):289-295
A类：
跨越式滚环等温扩增,滚环等温扩增技术,saltatory,SRCA,2x+2
B类：
技术结合,CRISPR,Cas12a,测海,海产品,副溶血性弧菌,rolling,circle,amplification,中副,Vibrio,parahemolyticus,靶标,系统识别,单链,样品检测,食源性致病菌,检测体系,菌液浓度,荧光信号,信号强度,线性方程,检出限,CFU,RSN,加标回收率,符合率,检测限,快速定量检测
AB值：
0.211301
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