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同步增菌结合实时荧光聚合酶链式反应快速检测食品中5种致病菌
文献摘要：
目的 实现食品中5种致病菌的同步增菌,并结合实时荧光聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)技术,建立快速检测的方法体系.方法 比较金黄色葡萄球菌、单核增生李斯特氏菌、大肠埃希氏菌O157:H7、副溶血性弧菌和鼠伤寒沙门氏菌5种目标菌分别在营养肉汤和缓冲蛋白胨水中的生长曲线;优化DNA模板提取的方法;采用实时荧光PCR技术及熔解曲线分析,建立5种致病菌的快速检测方法.结果 缓冲蛋白胨水可以作为5种目标菌的同步增菌液,增菌3 h后5种目标菌能被检出,最低检出的DNA浓度范围为10?3～10?4 ng/μL.经熔解曲线分析,5种目标菌的平均特征熔解温度(Tm)值范围为79.51～87.39℃.结论 本研究建立的5种致病菌快速检测方法,检测总时间大约为6 h,且方法灵敏度和特异性均能满足检测要求.
文献关键词：
同步增菌;食源性致病菌;实时荧光聚合酶链式反应;熔解曲线
中图分类号：
作者姓名：
姚艳玲;周宇东;刘骆强;管佳丽;谢琳
作者机构：
嘉兴市食品药品与产品质量检验检测院, 嘉兴 314050
文献出处：
引用格式：
[1]姚艳玲;周宇东;刘骆强;管佳丽;谢琳-.同步增菌结合实时荧光聚合酶链式反应快速检测食品中5种致病菌)[J].食品安全质量检测学报,2022(13):4258-4264
A类：
同步增菌
B类：
实时荧光聚合酶链式反应,real,polymerase,chain,reaction,方法体系,金黄色葡萄球菌,李斯特,大肠埃希氏菌,O157,H7,副溶血性弧菌,鼠伤寒沙门氏菌,目标菌,肉汤,和缓,蛋白胨,生长曲线,模板提取,熔解曲线分析,快速检测方法,菌液,Tm,检测要求,食源性致病菌
AB值：
0.232218
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