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黑曲霉脂肪酶基因的克隆及其在黑曲霉中的同源表达
文献摘要：
旨在研究黑曲霉脂肪酶基因在黑曲霉中的同源表达情况.利用黑曲霉基因组作为模板克隆8种脂肪酶基因,与双元表达载体pCAMBIA连接构建8个表达载体.通过原生质体-PEG转化法,实现8个脂肪酶基因在黑曲霉中同源表达,其中转化子MA-H3-PglaA-SglaA脂肪酶活性最高.对该酶进行分离纯化和酶学性质表征,酶最适温度45℃,最适pH 7.5,K+、Mg2+等金属离子对脂肪酶有显著激活作用.酶底物特异性实验发现,该酶对底物pNPA亲和力最高,脂肪酶ANL-H3的Km为1.893 mmol/L,Vmax为1.610 mmol/(L·min).该研究为黑曲霉脂肪酶的同源表达提供了有效的策略和数据支持,可为食品级脂肪酶的开发和应用提供理论基础.
文献关键词：
黑曲霉;脂肪酶;基因克隆;同源表达;酶学性质
中图分类号：
作者姓名：
赵书范;李琪;聂红梅;汪钊;郑建永
作者机构：
浙江工业大学 生物工程学院,浙江 杭州,310032
文献出处：
引用格式：
[1]赵书范;李琪;聂红梅;汪钊;郑建永-.黑曲霉脂肪酶基因的克隆及其在黑曲霉中的同源表达)[J].食品与发酵工业,2022(09):14-19
A类：
PglaA,SglaA,pNPA
B类：
黑曲霉,酶基因,同源表达,双元表达载体,pCAMBIA,原生质体,PEG,转化法,转化子,MA,H3,脂肪酶活性,分离纯化,酶学性质,性质表征,K+,Mg2+,金属离子,离子对,酶底物,底物特异性,亲和力,ANL,Km,Vmax,食品级,基因克隆
AB值：
0.298864
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