典型文献
古尔图病毒核蛋白的原核表达纯化及ELISA检测方法的建立
文献摘要：
目的:获得纯化的GTV-rNP蛋白抗原，并建立快速准确检测GTV抗体的ELISA法。方法:人工合成密码子优化的 GTV-NP 编码基因，克隆至 pET32a（+）载体，构建重组表达质粒，转化至 BL21（DE3）。将优化表达获得的蛋白经Ni柱纯化后用SDS-PAGE和Western blot鉴定。以纯化蛋白为抗原，建立并优化GTV IgG抗体间接ELISA检测方法，并对其进行评价和初步应用。结果:成功构建原核表达质粒pET32a-NP，重组蛋白以包涵体形式在大肠杆菌中高效表达，大小约为44 kD，Western blot结果表明重组蛋白与GTV阳性血清具有良好的抗原性。建立的ELISA法特异性强、敏感性高、批内和批间的变异系数均小于10%具有较好的重复性；检测结果与IFA检测结果符合率达到92.77%。结论:建立的GTV NP 抗体检测ELISA方法的敏感性、重复性和特异性均较好。
文献关键词：
核蛋白类;酶联免疫吸附测定;血清学试验;表达纯化;古尔图病毒
中图分类号：
作者姓名：
蒋柏勇;阿来·沙力塔那;美丽排提·玉素甫;张敬媛;王俊忠;邓菲;张渝疆;孙素荣
作者机构：
新疆大学生命科学与技术学院 新疆生物资源基因工程重点实验室，新疆乌鲁木齐 830046;中国科学院武汉病毒研究所，武汉 430064;华中科技大学同济医学院附属协和医院，武汉 430022;新疆疾病预防控制中心 乌鲁木齐 830092
文献出处：
引用格式：
[1]蒋柏勇;阿来·沙力塔那;美丽排提·玉素甫;张敬媛;王俊忠;邓菲;张渝疆;孙素荣-.古尔图病毒核蛋白的原核表达纯化及ELISA检测方法的建立)[J].中华预防医学杂志,2022(06):824-830
A类：
古尔图病毒,rNP,核蛋白类
B类：
原核表达,表达纯化,GTV,快速准确,人工合成,密码子优化,编码基因,pET32a,重组表达,质粒,BL21,DE3,SDS,PAGE,blot,IgG,初步应用,重组蛋白,包涵体,大肠杆菌,高效表达,kD,阳性血清,抗原性,法特,IFA,符合率,抗体检测,酶联免疫吸附测定,血清学试验
AB值：
0.310131
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