典型文献
鳉鱼肠激酶在大肠埃希菌中的可溶性表达、纯化及活性鉴定
文献摘要：
目的 利用大肠埃希菌表达系统实现鳉鱼肠激酶(enterokinase,EK)的可溶性表达,经纯化后获得具有酶切活性的重组鳉鱼EK.方法 通过基因工程技术,构建pGEX-EK重组质粒,转化至TransB(DE3)化学感受态细胞,IPTG诱导表达获得可溶的GST-EK融合蛋白,经谷胱甘肽(glutathione,GSH)亲和层析、离子交换层析,获得EK,并进行活性分析及酶切特异性试验.结果 pGEX-EK重组质粒经双酶切及测序鉴定证明构建正确,经可溶性标签实现了具有生物活性的鳉鱼EK的可溶性表达,酶比活性为46 IU/mg,且具有较高的酶切特异性.结论 通过使用GST融合标签成功实现了鳉鱼EK在大肠埃希菌中的可溶性表达,为实现EK的可溶性表达提供了新思路.
文献关键词：
肠激酶;鳉鱼;大肠埃希菌;可溶性表达;融合标签
中图分类号：
作者姓名：
张五妮;刘玉林;朱秋媚;王江林;毕江坤;俞露;张宇
作者机构：
长春生物制品研究所有限责任公司细胞因子室,吉林长春130012
文献出处：
引用格式：
[1]张五妮;刘玉林;朱秋媚;王江林;毕江坤;俞露;张宇-.鳉鱼肠激酶在大肠埃希菌中的可溶性表达、纯化及活性鉴定)[J].中国生物制品学杂志,2022(06):678-684
A类：
enterokinase
B类：
鳉鱼,鱼肠,肠激酶,大肠埃希菌,可溶性表达,活性鉴定,表达系统,系统实现,EK,基因工程技术,pGEX,重组质粒,TransB,DE3,化学感受,感受态,IPTG,诱导表达,GST,融合蛋白,谷胱甘肽,glutathione,GSH,亲和层析,离子交换层析,活性分析,酶切特异性,粒经,双酶,比活性,IU,融合标签
AB值：
0.333292
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