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非洲猪瘟病毒p54蛋白的截短表达及其单克隆抗体的制备
文献摘要：
非洲猪瘟在我国首次暴发至今已经3年多,给我国养猪业及其相关产业带来了严重的损失.本试验主要以非洲猪瘟病毒E183L基因编码的p54蛋白为研究对象,设计扩增截短E183L基因的引物,构建p54蛋白重组表达载体pET-28a(+)-p54,转化至感受态细胞BL21(DE3)中进行诱导表达,获得可溶性表达的重组p54蛋白,通过Ni柱得到良好纯化.之后免疫BALB/c小鼠,将免疫小鼠的脾脏与骨髓瘤细胞融合制备单克隆抗体,通过ELISA方法筛选和3次亚克隆共制备出2株能稳定分泌针对ASFV p54蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞株.经ELISA测定抗体腹水效价在1∶100 000～1 ∶1 000 000之间.Western blot检测表明单克隆抗体与p54蛋白能够特异性反应.经鉴定2株单克隆抗体亚型均为IgG2b,κ.该研究获得的单克隆抗体将为p54蛋白的生物学功能的研究和ASFV血清学检测奠定基础.
文献关键词：
非洲猪瘟病毒;p54蛋白;原核表达;单克隆抗体
中图分类号：
作者姓名：
郑南南;东梦珂;吴宏举;侯浩宇;陈寅龙;李潮;赵慧君;张改平;杜永坤
作者机构：
河南农业大学动物医学院国家动物免疫学国际联合研究中心,河南郑州450046
文献出处：
引用格式：
[1]郑南南;东梦珂;吴宏举;侯浩宇;陈寅龙;李潮;赵慧君;张改平;杜永坤-.非洲猪瘟病毒p54蛋白的截短表达及其单克隆抗体的制备)[J].中国兽医学报,2022(11):2139-2144
A类：
E183L
B类：
非洲猪瘟病毒,p54,截短表达,单克隆抗体的制备,发至,养猪业,相关产业,产业带,基因编码,引物,重组表达,表达载体,pET,28a,感受态,BL21,DE3,诱导表达,可溶性表达,BALB,脾脏,骨髓瘤细胞,细胞融合,亚克,ASFV,杂交瘤细胞株,腹水,水效,效价,blot,抗体亚型,IgG2b,生物学功能,血清学检测,原核表达
AB值：
0.288916
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