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典型文献
尼帕病毒受体结合糖蛋白在哺乳动物细胞中的可溶性表达和纯化及小鼠抗血清制备
文献摘要:
参照GenBank中尼帕病毒受体结合蛋白(G蛋白)编码序列,使用DNAStar软件对各基因型尼帕病毒G蛋白进行核苷酸、氨基酸同源性分析,并绘制进化树,选择代表性毒株(NCBI登录号:AF212302.2),截取合成G蛋白头部结构域(sG)的核苷酸序列,连接至pcDNA3.1(+)真核表达载体上,构建为重组质粒pcDNA-sG,将测序正确的重组质粒在Expi293F细胞中进行表达,利用蛋白免疫印迹(Western blot)进行鉴定.通过Strep-Tactin XT亲和层析纯化目的 蛋白,薄层扫描分析蛋白纯度.用获得的sG免疫小鼠制备抗sG蛋白的多克隆抗体血清,并通过间接ELISA鉴定结合活性.结果 显示,尼帕病毒G蛋白在Expi293F细胞中获得可溶性表达,纯化得到的目的 蛋白大小正确,纯度大于99%;制备的抗血清能特异性结合目的 蛋白.
文献关键词:
尼帕病毒;病毒受体结合蛋白;真核表达;多克隆抗体
作者姓名:
高子函;宋丽娜;许汪;李乐天;郝鹏飞;伊立超;郝嘉翼;时小双;于成东;李凯;徐鹏;金宁一;李昌
作者机构:
军事科学院军事医学研究院军事兽医研究所中国医学科学院人兽共患病毒病防控关键技术研究创新单元,吉林长春130122
文献出处:
引用格式:
[1]高子函;宋丽娜;许汪;李乐天;郝鹏飞;伊立超;郝嘉翼;时小双;于成东;李凯;徐鹏;金宁一;李昌-.尼帕病毒受体结合糖蛋白在哺乳动物细胞中的可溶性表达和纯化及小鼠抗血清制备)[J].中国兽医学报,2022(01):82-88,106
A类:
病毒受体结合蛋白,AF212302,sG,Expi293F,Tactin
B类:
尼帕病毒,糖蛋白,哺乳动物细胞,可溶性表达,抗血清,GenBank,编码序列,DNAStar,基因型,同源性分析,进化树,毒株,NCBI,登录号,截取,白头,结构域,pcDNA3,真核表达载体,重组质粒,蛋白免疫印迹,blot,Strep,XT,亲和层析,层析纯化,薄层,蛋白纯度,多克隆抗体,结合活性,特异性结合
AB值:
0.27048
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