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典型文献
非洲猪瘟病毒A151R蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达及鉴定
文献摘要:
非洲猪瘟是由非洲猪瘟病毒(ASFV)引起的一种高致死性传染病,对养猪业危害巨大.为了提供有效的抗原蛋白用于ASFV的临床诊断及免疫预防研究,本试验将ASFV SY18株A151R蛋白的基因序列进行密码子优化,并克隆至pET28a载体,双酶切验证得到大小分别为450 bp和5300 bp的片段,验证重组载体正确.重组载体pET28a-A151R转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,添加pG-Tf2载体以提供伴侣分子帮助目的蛋白折叠,并通过摇瓶发酵考察目的蛋白的表达.SDS-PAGE与Image-Pro Plus软件分析结果表明,A151R蛋白可实现65.4%的可溶性表达,蛋白分子量大小为17 kDa,利用亲和层析纯化所得目的蛋白纯度达到97.4%.Western blot结果显示,A151R蛋白可被ASFV阳性血清识别,表明其反应性良好.本研究首次实现A151R蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达,为ASFV诊断及其疫苗的研究提供了较好的候选抗原蛋白.
文献关键词:
非洲猪瘟;A151R蛋白;可溶性表达;Western blot
作者姓名:
李鹏昊;刘鹏;吴芃;梁严予;关洋;李向东;逄文强;田克恭
作者机构:
国家兽用药品工程技术研究中心,洛阳471003
引用格式:
[1]李鹏昊;刘鹏;吴芃;梁严予;关洋;李向东;逄文强;田克恭-.非洲猪瘟病毒A151R蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达及鉴定)[J].中国动物传染病学报,2022(02):142-146
A类:
A151R,Tf2
B类:
非洲猪瘟病毒,大肠杆菌,可溶性表达,ASFV,高致,死性,养猪业,抗原蛋白,白用,免疫预防,SY18,基因序列,密码子优化,pET28a,双酶,bp,重组载体,BL21,DE3,感受态,pG,伴侣,目的蛋白,蛋白折叠,摇瓶发酵,SDS,PAGE,Image,Pro,Plus,分子量,kDa,亲和层析,层析纯化,蛋白纯度,blot,阳性血清,反应性,候选抗原
AB值:
0.327144
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