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典型文献
蓖麻矮化相关RcDof蛋白的原核表达及纯化
文献摘要:
目的 原核表达并纯化蓖麻矮化相关RcDof蛋白.方法 利用SignalP 4.0 server和Iprscan软件分别预测RcDof基因的信号肽和结构域.从pMD-18T-RcDof质粒中PCR扩增RcDof(44-101)基因,克隆入原核表达载体pETMBP-XE,构建原核表达质粒pETMBP-XE-RcDof(44-101),IPTG诱导表达重组蛋白,利用亲和层析、阳离子交换层析以及分子筛层析对目的蛋白进行纯化.结果 RcDof基因无信号肽剪切序列,在44~101个碱基之间存在1个锌指保守结构域.重组表达质粒经双酶切及测序鉴定证明构建正确.表达的重组蛋白相对分子质量约43 000,以可溶形式存在于上清中.纯化的重组蛋白纯度较高,浓度为10 mg/mL.结论 获得了高纯度可溶RcDof蛋白,为解析其晶体结构及探索其在蓖麻中作用的分子机制提供了实验依据.
文献关键词:
蓖麻;RcDof基因;蛋白纯化
作者姓名:
张帅;王双;李跃;李国瑞;黄凤兰;陈永胜
作者机构:
内蒙古民族大学农学院,内蒙古通辽028000;内蒙古民族大学生命科学与食品学院,内蒙古通辽028000;沈阳农业大学食品学院,辽宁沈阳110866;内蒙古民族大学内蒙古自治区高校蓖麻产业工程技术研究中心内蒙古自治区蓖麻育种重点实验室内蒙古自治区蓖麻产业协同创新培育中心,内蒙古通辽028000
引用格式:
[1]张帅;王双;李跃;李国瑞;黄凤兰;陈永胜-.蓖麻矮化相关RcDof蛋白的原核表达及纯化)[J].中国生物制品学杂志,2022(04):418-423
A类:
RcDof,Iprscan,18T,pETMBP
B类:
蓖麻,矮化,SignalP,server,信号肽,pMD,质粒,入原,原核表达载体,XE,IPTG,诱导表达,重组蛋白,亲和层析,阳离子交换,离子交换层析,分子筛层析,目的蛋白,碱基,锌指,保守结构域,重组表达,粒经,双酶,白相,相对分子质量,上清,蛋白纯度,高纯度,晶体结构,蛋白纯化
AB值:
0.31445
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