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典型文献
猪IFN-α14的表达、纯化及抗病毒活性分析
文献摘要:
干扰素(interferon,IFN)是一类具有抗病毒和免疫调节功能的细胞因子,目前已经应用于多种人和动物病毒病的预防和治疗.不同猪干扰素亚型的抗病毒活性差异较大,为了解猪IFN-α14的抗病毒活性,将猪IFN-α14基因序列进行分析,去除信号肽、优化密码子,并采用基因合成的方法 合成了猪IFN-a14亚型基因,将其克隆入pCSMH原核表达载体,优化诱导条件,利用Ni琼脂糖凝胶纯化柱进行亲和层析,获得高纯度的重组猪IFN-α14蛋白,Western blot检测证明重组蛋白具有较好的特异性.用不同浓度的重组猪IFN-α14处理Vero细胞后,接种1 000 TCID50猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV),24 h收集细胞和上清,通过荧光定量检测细胞内病毒的RNA水平,同时测定细胞上清中病毒的TCID50.猪IFN-α14蛋白被成功表达并纯化,证明了10μg/L的重组猪IFN-α14干扰素能够显著抑制PEDV的复制.与本实验室前期表达纯化的猪IFN-α2、8相比,猪IFN-α14抑制PEDV复制的活性显著提高,为新型抗病毒药物开发提供了重要的依据和数据支持.
文献关键词:
猪IFN-α14;抗病毒活性;大肠杆菌表达;猪流行性腹泻病毒
作者姓名:
方剑玉;白杰;席燕燕;黄慧敏;徐引弟;王改利;张青娴;徐彬;李绍钰;王克领
作者机构:
河南省农业科学院畜牧兽医研究所,河南郑州450002;畜禽繁育与营养调控河南省重点实验室,河南郑州450002;河南省农业科学院动物免疫学重点实验室,河南郑州450002
文献出处:
引用格式:
[1]方剑玉;白杰;席燕燕;黄慧敏;徐引弟;王改利;张青娴;徐彬;李绍钰;王克领-.猪IFN-α14的表达、纯化及抗病毒活性分析)[J].中国兽医学报,2022(10):1994-2000
A类:
a14,pCSMH
B类:
IFN,抗病毒活性,活性分析,干扰素,interferon,免疫调节,调节功能,动物病毒,病毒病,预防和治疗,基因序列,信号肽,密码子,基因合成,原核表达载体,诱导条件,琼脂糖凝胶,亲和层析,高纯度,blot,重组蛋白,Vero,TCID50,猪流行性腹泻病毒,porcine,epidemic,diarrhea,virus,PEDV,上清,荧光定量检测,同时测定,表达纯化,新型抗病毒药物,药物开发,大肠杆菌表达
AB值:
0.292136
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