典型文献
毒害艾美耳球虫配子体抗原EnGAM22单克隆抗体的制备与鉴定
文献摘要:
旨在制备毒害艾美耳球虫(Eimeria necatrix)配子体抗原EnGAM22单克隆抗体,用Ni-NTA亲和层析纯化的重组抗原rEnGAM22免疫BALB/c小鼠,免疫3次后,取脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,用预先建立的ELISA方法筛选阳性杂交瘤细胞,经有限稀释法对阳性杂交瘤细胞进行4次亚克隆后,获得2株能稳定分泌特异性抗体的杂交瘤细胞株并命名为2F3和3D3;对单抗亚类和特异性进行鉴定,应用单抗识别天然蛋白和虫体定位.结果显示,单克隆抗体2F3和3D3亚类分别为IgG2a、IgG2b,纯化后腹水效价分别为1 ∶256 000,1∶64 000,能特异性识别重组抗原rEnGAM22和毒害艾美耳球虫天然配子体蛋白;免疫荧光定位显示单克隆抗体2F3和3D3能特异性识别大配子体的成壁体和卵囊壁,表明EnGAM22抗原参与卵囊壁的形成.制备的单克隆抗体为研究球虫卵囊壁形成的分子机制奠定了基础.
文献关键词:
毒害艾美耳球虫;配子体蛋白;单克隆抗体;制备;鉴定
中图分类号:
作者姓名:
蔡为民;李文静;王乐乐;苏丁泽阳;朱玉;刘丹丹;许金俊;陶建平
作者机构:
扬州大学兽医学院,江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心,扬州225009
文献出处:
引用格式:
[1]蔡为民;李文静;王乐乐;苏丁泽阳;朱玉;刘丹丹;许金俊;陶建平-.毒害艾美耳球虫配子体抗原EnGAM22单克隆抗体的制备与鉴定)[J].畜牧兽医学报,2022(03):875-882
A类:
EnGAM22,rEnGAM22,3D3,配子体蛋白
B类:
毒害艾美耳球虫,单克隆抗体的制备,Eimeria,necatrix,NTA,亲和层析,层析纯化,重组抗原,BALB,脾细胞,骨髓瘤细胞,SP2,有限稀释,稀释法,亚克,特异性抗体,杂交瘤细胞株,2F3,单抗,亚类,虫体,IgG2a,IgG2b,腹水,水效,效价,特异性识别,免疫荧光定位,球虫卵囊
AB值:
0.225419
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