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一种基于凝胶过滤层析的水疱性口炎病毒(VSV)的纯化方法
文献摘要：
本研究目的是开发出一套简单有效的水疱性口炎病毒(VSV)的纯化方法,该方法可为基于VSV的医用治疗平台相应的载体,也可为疫苗及溶瘤剂的研发提供一定的技术支撑和物质储备.选用BHK细胞作为VSV复制的载体,并通过显微镜观察细胞病变(CPE)的出现;应用凝胶过滤层析法对收获且处理过的病毒液进行纯化,包括第1轮饱和硫酸铵沉淀高盐除杂和第2轮以严格的吸收峰洗脱为特色的凝胶过滤层析的进一步纯化.通过SDS-PAGE、Western blot、ELISA、电镜验证等分析纯化产物的纯度和准确性.SDS-PAGE显示本方法明显除去病毒上清中大部分杂质;Western blot、ELISA、电镜证实纯化产物是VSV病毒.经使用Reed-Muench法计算病毒的半数组织细胞感染量(TCID50)效价为10-2.72,RT-PCR的方法鉴定毒株为印第安纳毒株(Indiana,IN).上述结果表明,本研究成功研制出一套方便、高效、简易的VSV纯化方法,为VSV的纯化和使用提供了参考依据.
文献关键词：
VSV;凝胶过滤层析;Western blot;透射电镜;RT-PCR
中图分类号：
作者姓名：
孙赫;岳玉环;赵永坤;吴广谋;田园;张守峰;张国利;李泽鸿
作者机构：
吉林农业大学生命科学学院,吉林长春130118;中国农业科学院长春兽医研究所,吉林长春130122
文献出处：
引用格式：
[1]孙赫;岳玉环;赵永坤;吴广谋;田园;张守峰;张国利;李泽鸿-.一种基于凝胶过滤层析的水疱性口炎病毒(VSV)的纯化方法)[J].中国兽医学报,2022(06):1163-1167,1212
A类：
Indiana
B类：
凝胶过滤层析,水疱性口炎病毒,VSV,纯化方法,研究目的,医用,BHK,细胞病变,CPE,层析法,毒液,饱和硫酸铵,高盐,除杂,吸收峰,洗脱,SDS,PAGE,blot,纯化产物,除去,上清,Reed,Muench,半数,数组,组织细胞,细胞感染,TCID50,效价,毒株,印第安纳,IN,透射电镜
AB值：
0.321562
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