典型文献
重组草鱼干扰素IFNγ原核表达及其抗GCRV效果
文献摘要:
近年来,由草鱼呼肠孤病毒(Grass carp reovirus,GCRV)引发的草鱼出血病给该产业造成了严重的损失.为探究重组干扰素对草鱼(Ctenopharyngodon idella)的免疫保护作用及其作用机制,本研究构建草鱼干扰素γ(interferonγ,IFNγ)的原核表达载体PET-30a-rCiIFNγ,并转入大肠杆菌(Escherichia coli)Transetta(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达及镍柱层析法纯化后获得重组蛋白rCiIFNγ;通过细胞病变效应(cytopathic effect,CPE)检测rCiIFNγ的体外抗病毒活性;进一步在攻毒实验中评价rCiIFNγ免疫对草鱼体内抗GCRV感染的影响.结果显示,重组草鱼IFNγ融合蛋白(rCiIFNγ)分子量约23 kD,纯化复性后的rCiIFNγ抗病毒效价达2.8×103 U/μg;rCiIFNγ不仅能在体外抑制GCRV引起的细胞病变,还可以诱导草鱼肝、脾、肾、肠中IFN、IRFl、IRF7、Mx、PKR和STAT3等干扰素激活基因的表达,并能显著降低GCRV攻毒草鱼的死亡率.上述结果提示重组草鱼IFNγ融合蛋白rCiIFNγ具有明显的体内和体外抗GCRV效果.本研究为草鱼IFNγ在抗病毒方面的应用提供了参考依据.
文献关键词:
草鱼;重组干扰素;干扰素γ(IFNγ);抗病毒活性;草鱼呼肠孤病毒(GCRV)
中图分类号:
作者姓名:
袁雪梅;徐铃威;黄雷;郝贵杰;蔺凌云;潘晓艺;姚嘉赟;沈锦玉
作者机构:
农业农村部淡水渔业健康养殖重点实验室/浙江省鱼类健康与营养重点实验室/浙江省淡水水产研究所,湖州313001;杭州市萧山区农(林)业技术推广中心水产站,杭州311225
文献出处:
引用格式:
[1]袁雪梅;徐铃威;黄雷;郝贵杰;蔺凌云;潘晓艺;姚嘉赟;沈锦玉-.重组草鱼干扰素IFNγ原核表达及其抗GCRV效果)[J].农业生物技术学报,2022(07):1348-1356
A类:
rCiIFN,IRFl
B类:
GCRV,草鱼呼肠孤病毒,Grass,carp,reovirus,草鱼出血病,重组干扰素,Ctenopharyngodon,idella,免疫保护,研究构建,interferon,原核表达载体,PET,30a,转入,大肠杆菌,Escherichia,coli,Transetta,DE3,感受态,IPTG,诱导表达,柱层析法,重组蛋白,过细,细胞病变效应,cytopathic,effect,CPE,外抗,抗病毒活性,攻毒实验,鱼体,融合蛋白,分子量,kD,效价,体外抑制,鱼肝,IRF7,Mx,PKR,STAT3,毒草
AB值:
0.343868
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