以小鼠三叉神经节(TG)原代细胞为基础,应用实时荧光定量PCR(q-PCR)、Western blot等方法检测伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)(MOI=1)感染TG细胞后不同时间点PI3K、Akt基因的转录水平和蛋白表达情况.PRV感染TG细胞后,利用PI3K特异性抑制剂LY294002处理后的TG细胞,通过Annexin V-FITC原位荧光检测方法、流式细胞术和Western blot方法观察细胞凋亡以及检测Akt下游凋亡相关因子Bcl-2以及Bax的表达.结果 显示,PRV感染TG细胞后早期会促进PI3K、Akt基因mRNA转录(P＜0.01),但随着时间推移对PI3K、Akt基因的转录产生抑制作用(P＜0.01);Western blot结果显示PRV感染TG细胞的早期会显著诱导Akt的磷酸化,而对PI3K及Akt的蛋白表达呈现出抑制作用或先促进后抑制的现象,与mRNA转录情况基本一致;同时,IFA观察到TG细胞内Akt发生明显的磷酸化.与对照组相比,PRV感染阻断PI3K的TG细胞出现了明显的细胞凋亡现象,且Bcl-2/Bax比值下降,说明PRV感染TG细胞后会调控PI3K/Akt信号通路并通过该通路抑制细胞凋亡.该研究结果为深入阐明PRV感染TG细胞的致病机制以及探究PRV在TG细胞中潜伏感染的过程奠定基础.

PRV;三叉神经节细胞;PI3K/Akt;细胞凋亡

张森;汤德元;曾智勇;王彬;黄涛;杨志刚;晏仁潭;韩超逸;陈阊峥;罗柳

贵州大学动物科学学院,贵州贵阳550025

中国兽医学报

[1]张森;汤德元;曾智勇;王彬;黄涛;杨志刚;晏仁潭;韩超逸;陈阊峥;罗柳-.PRV感染三叉神经节细胞对PI3K/Akt信号通路的影响及其调控凋亡)[J].中国兽医学报,2022(02):208-217

三叉神经节细胞

PRV,PI3K,Akt,原代细胞,blot,伪狂犬病病毒,pseudorabies,virus,MOI,不同时间点,转录水平,LY294002,Annexin,FITC,荧光检测,流式细胞术,相关因子,Bcl,Bax,期会,时间推移,磷酸化,表达呈现,IFA,后会,致病机制,潜伏感染

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