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伪狂犬病病毒gB和gE蛋白重组表达及抗体间接ELISA检测方法的建立
文献摘要:
本研究利用PCR扩增伪狂犬病病毒(PRV)Bartha-K61株gB基因核心抗原区和闵A株gE基因核心抗原区,构建了重组质粒pET-32a-gB和pET-32a-gE,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导进行表达.SDS-PAGE分析表明,pET32a-gB蛋白分子量约为44 kDa,pET32a-gE蛋白分子量约为41 kDa.分别以gB和gE重组蛋白作为包被抗原,建立了PRV抗体间接ELISA检测方法.该方法中重组蛋白仅与PRV阳性血清发生特异性反应,检测敏感性可达到1:1600,批内重复性和批间重复性变异系数均小于10%.本研究建立的间接ELISA方法可用于PRV抗体的监测,鉴别疫苗免疫抗体和野毒感染抗体,有利于猪伪狂犬病净化工作.
文献关键词:
猪伪狂犬病病毒;gB基因;gE基因;蛋白表达;间接ELISA
中图分类号:
作者姓名:
张洪亮;郝占武;解倩倩;王凤雪;张志;韩先杰;单虎;温永俊
作者机构:
青岛农业大学动物医学院 山东省新兽药创制协同创新中心 青岛市兽医生物技术工程研究中心,青岛266109;内蒙古农业大学兽医学院 农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室,呼和浩特010018;中国动物卫生与流行病学中心,青岛266032
文献出处:
引用格式:
[1]张洪亮;郝占武;解倩倩;王凤雪;张志;韩先杰;单虎;温永俊-.伪狂犬病病毒gB和gE蛋白重组表达及抗体间接ELISA检测方法的建立)[J].中国动物传染病学报,2022(01):98-105
A类:
B类:
gB,gE,重组表达,研究利用,PRV,Bartha,K61,核心抗原,重组质粒,大肠杆菌,BL21,DE3,感受态,IPTG,导进,SDS,PAGE,pET32a,分子量,kDa,重组蛋白,包被抗原,阳性血清,疫苗免疫,免疫抗体,野毒感染,感染抗体,猪伪狂犬病病毒
AB值:
0.267587
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