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GRP78在伪狂犬病病毒感染过程中的作用研究
文献摘要:
为探究热休克蛋白70家族成员葡萄糖调节蛋白78(GRP78)在伪狂犬病病毒(PRV)感染宿主过程中的作用,本研究利用PRV Min-A株感染PK-15细胞后,采用western blot和间接免疫荧光试验(IFA)分别检测GRP78蛋白的表达和亚细胞定位情况,western blot结果显示,与对照组相比,PRV感染组的GRP78蛋白水平未见明显变化;IFA结果显示,PRV感染组细胞膜上GRP78的荧光强度明显增加.进一步通过生物素标记细胞膜蛋白,然后利用磁珠分离细胞膜蛋白,经western blot检测结果显示,PRV感染组细胞膜中GRP78的蛋白水平显著高于未感染PRV的对照组(P<0.05).可见PRV感染不影响细胞内GRP78蛋白的表达,但能够增加GRP78在细胞膜中的含量.利用GRP78多克隆抗体(pAb)与PK-15细胞共孵育lh后感染PRV,经空斑试验检测细胞上清中的病毒滴度,结果显示,与对照组相比,GRP78pAb孵育组的病毒滴度未见明显变化,表明GRP78并不是PRV侵入宿主细胞的关键因子.通过IFA检测GRP78与PRV在细胞中的共定位情况,结果显示,GRP78与PRV在细胞膜上无共定位,但二者在细胞质中有共定位.分别在PK-15细胞中下调或者过表达GRP78后感染PRV,采用western blot和空斑试验分别检测细胞内PRV的蛋白合成和细胞上清中的病毒滴度,结果显示,GRP78下调后PRV蛋白和病毒滴度显著低于对照组(P<0.05),而过表达GRP78组的病毒滴度明显高于对照组,表明GRP78参与调节PRV的释放.本研究首次表明GRP78作为一种重要的宿主因子参与调节PRV从宿主细胞内的释放,该结果为进一步研究PRV与宿主细胞的相互作用提供了参考依据.
文献关键词:
葡萄糖调节蛋白78;伪狂犬病病毒;细胞膜;感染
中图分类号:
作者姓名:
薛晓暖;郑小惠;辛航阔;谢青青;刘坤;祁保民;朱婷
作者机构:
福建农林大学动物科学学院/蜂学学院福建省畜禽病原感染与免疫学重点实验室,福建 福州 350002
文献出处:
引用格式:
[1]薛晓暖;郑小惠;辛航阔;谢青青;刘坤;祁保民;朱婷-.GRP78在伪狂犬病病毒感染过程中的作用研究)[J].中国预防兽医学报,2022(10):1039-1044,1058
A类:
pAb,GRP78pAb
B类:
伪狂犬病病毒,热休克蛋白,调节蛋白,PRV,研究利用,Min,PK,western,blot,间接免疫荧光试验,IFA,亚细胞定位,细胞膜,荧光强度,生物素标记,膜蛋白,磁珠分离,未感染,多克隆抗体,孵育,lh,空斑试验,试验检测,上清,病毒滴度,主细胞,关键因子,共定位,细胞质,过表达,蛋白合成,而过,宿主因子
AB值:
0.184234
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