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单纯疱疹病毒2型衣壳支架蛋白ICP35原核表达载体的构建及其表达特性分析
文献摘要：
本研究旨在构建单纯疱疹病毒2型(herpes simplex virus type 2,HSV-2)衣壳支架蛋白ICP35的原核表达载体,并分析其在HSV-2增殖中的表达特性.以HSV-2基因组DNA为模板,采用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增HSV-2 ICP35的编码基因UL26.5,并克隆至原核表达载体pET-32a(+),转化大肠埃希菌BL21(DE3)进行诱导表达,将纯化的重组ICP35免疫家兔后获得抗体,采用免疫荧光检测ICP35在HSV-2增殖中的表达特性.结果显示,HSV-2 UL26.5基因的PCR产物大小约为1065 bp,原核表达重组蛋白的相对分子质量约为6.3×104,免疫家兔的血清抗体可特异性识别HSV-2 ICP35.免疫荧光检测结果显示,HSV-2 ICP35可在感染后8 h出现于细胞核周围,12 h表达量进一步增加并向细胞核内聚集,16 h后在细胞核、细胞质内均可检测到聚集成斑点状的衣壳支架蛋白.结果表明,HSV-2 ICP35原核表达载体的成功构建及对其在HSV-2增殖中表达特性的分析,将为研究UL26.5基因的功能、蛋白相互作用、病毒与宿主的相互作用及筛选药物靶标等奠定基础.
文献关键词：
单纯疱疹病毒2型;衣壳支架蛋白ICP35;UL26.5;原核表达载体;表达特性
中图分类号：
作者姓名：
王建斌;李雪琦;王丽春;吴化叶;程继帅;牟唐维;李琦涵
作者机构：
中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所,云南省重大传染病疫苗研发重点实验室,云南昆明 650118
文献出处：
引用格式：
[1]王建斌;李雪琦;王丽春;吴化叶;程继帅;牟唐维;李琦涵-.单纯疱疹病毒2型衣壳支架蛋白ICP35原核表达载体的构建及其表达特性分析)[J].微生物与感染,2022(01):9-17
A类：
ICP35,UL26
B类：
单纯疱疹病毒,衣壳,原核表达载体,表达特性,herpes,simplex,virus,type,HSV,聚合酶链反应,polymerase,chain,reaction,编码基因,pET,32a,大肠埃希菌,BL21,DE3,诱导表达,家兔,免疫荧光检测,bp,重组蛋白,相对分子质量,血清抗体,特异性识别,细胞核,内聚,细胞质内,斑点状,蛋白相互作用,宿主,药物靶标
AB值：
0.219541
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