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典型文献
单纯疱疹病毒2型糖蛋白D和CCL28佐剂双顺反子重组DNA疫苗对小鼠的免疫保护效果
文献摘要:
目的:研究内部核糖体进入位点(internal ribosome entry site,IRES)序列连接"抗原-佐剂"的单纯疱疹病毒2型(herpes simplex virus type 2, HSV-2)DNA疫苗对免疫小鼠的保护作用。方法:利用IRES重组构建HSV-2包膜糖蛋白D(glycoprotein D,gD)和CCL28佐剂双表达DNA疫苗pgD-IRES-CCL28和pCCL28-IRES-gD,经测序验证,肌肉注射免疫BALB/c小鼠2次后,定期收集小鼠的血清和阴道灌洗液样品,分离免疫后的脾细胞、肠系膜淋巴结细胞和直肠黏膜组织。通过终点ELISA法检测免疫后小鼠的抗原特异性抗体滴度,采用体外中和试验检测免疫后及攻毒后血清和阴道灌洗液中的中和抗体滴度,采用脾细胞和肠系膜淋巴结细胞趋化试验和直肠组织的免疫组织化学染色检测组织和器官内的CCL28响应性免疫细胞变化。对免疫后小鼠进行阴道攻毒试验,采用荧光定量PCR、称量体重及观察疾病严重程度的方法评估各组小鼠抵抗病毒感染的能力。通过与1∶1混合的单独表达gD和CCL28的DNA疫苗(pgD+pCCL28)的免疫保护效果比较,分析IRES双表达DNA疫苗诱导的小鼠体液免疫和细胞免疫应答水平,以及免疫保护效果。结果:pCCL28-IRES-gD免疫小鼠后可产生与pgD+pCCL28组相似的血清IgG滴度、阴道灌洗液IgA抗体滴度,以及较高的抗体中和能力、直肠黏膜IgA+浆细胞和黏膜组织内CCL28响应性免疫细胞,攻毒后血清中和抗体出现较晚,但小鼠未出现体重减轻、疾病症状和死亡。但pgD+pcDNA3.1和pgD-IRES-CCL28对小鼠的免疫保护无效。结论:pCCL28-IRES-gD双表达DNA疫苗可诱导小鼠产生较强的黏膜免疫应答,有较强的免疫保护作用。
文献关键词:
单纯疱疹病毒2型;糖蛋白D;CCL28;中和试验;内部核糖体进入位点;免疫保护
作者姓名:
阎岩;胡勤学;付明;Chantsalmaa Davgadorj
作者机构:
无锡市第五人民医院感染与免疫实验室,无锡 214016;中国科学院武汉病毒研究所病毒学国家重点实验室,武汉 430071
引用格式:
[1]阎岩;胡勤学;付明;Chantsalmaa Davgadorj-.单纯疱疹病毒2型糖蛋白D和CCL28佐剂双顺反子重组DNA疫苗对小鼠的免疫保护效果)[J].中华微生物学和免疫学杂志,2022(05):342-350
A类:
pgD,pCCL28,pgD+pCCL28,IgA+,pgD+pcDNA3
B类:
单纯疱疹病毒,佐剂,顺反子,免疫保护效果,内部核糖体进入位点,internal,ribosome,entry,site,IRES,herpes,simplex,virus,type,HSV,组构,包膜,膜糖蛋白,glycoprotein,双表达,肌肉注射,BALB,期收,阴道灌洗液,脾细胞,肠系膜,淋巴结,直肠黏膜,肠黏膜组织,特异性抗体,抗体滴度,中和试验,试验检测,中和抗体,细胞趋化,免疫组织化学染色,响应性,免疫细胞,攻毒试验,称量,量体重,疾病严重程度,方法评估,抗病毒感染,效果比较,体液免疫,细胞免疫应答,免疫应答水平,IgG,浆细胞,体重减轻,疾病症状,黏膜免疫
AB值:
0.225368
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