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蛋白质二硫键异构酶a3的表达纯化、活性测定与小分子抑制剂的筛选
文献摘要：
目的 通过大肠杆菌表达并纯化蛋白质二硫键异构酶a3(PDIA3)为筛选其小分子抑制剂奠定基础.方法 通过RT-PCR获得PDIA3基因,构建重组质粒pET28a-PDIA3,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,Ni-NTA树脂亲和层析获得PDIA3,SDS-PAGE鉴定纯度,酶标仪测定活性,Specs商业化合物库虚拟筛选PDIA3的抑制物,胰岛素比浊法对抑制物进行抑酶活性测定.结果 克隆序列与基因库序列一致.获得的纯化PDIA3比活力为4.17 U/mg,PDIA3具有催化二硫键断裂的能力,筛选到的化合物去甲氧基姜黄素和41974954对PDIA3有抑制作用.结论 成功表达并纯化出PDIA3,筛选到的去甲氧基姜黄素和化合物41974954对PDIA3有抑制作用,为PDI蛋白抑制剂和抗血栓药物的研发奠定了基础.
文献关键词：
PDIA3;原核表达;蛋白纯化;抑制剂;虚拟筛选
中图分类号：
作者姓名：
宋煜;李海涛;邵敏;周鹤峰
作者机构：
遵义医科大学珠海校区 生物工程教研室,广东 珠海 519000;遵义医科大学珠海校区 生物化学教研室,广东 珠海519000
文献出处：
引用格式：
[1]宋煜;李海涛;邵敏;周鹤峰-.蛋白质二硫键异构酶a3的表达纯化、活性测定与小分子抑制剂的筛选)[J].遵义医科大学学报,2022(06):775-781
A类：
Specs
B类：
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AB值：
0.281312
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