典型文献
CD83重组蛋白的原核表达、复性纯化及多克隆抗体制备
文献摘要：
目的:利用原核表达系统表达、纯化CD83蛋白,制备CD83多克隆抗体.方法:构建CD83胞外结构域的原核表达质粒,利用TOP10F'菌株表达,使用IPTG诱导并寻找最佳条件;采用0.3％SKL将包涵体溶解变性,透析复性后通过GST亲和层析纯化GST-CD83蛋白;通过QuickAntibody免疫佐剂免疫SD大鼠制备CD83多克隆抗体,ELISA分析抗体的反应活性和特异性.结果:成功构建重组质粒pGEX-2T-CD83(Met1-Arg133),获得最佳诱导条件:0.2mmol/LIPTG、25℃、O/N.成功获得CD83重组蛋白,免疫大鼠后获得了特异性及活性较高且效价为1:104-1:105的多克隆抗体.结论:获得的CD83重组蛋白及多克隆抗体,为后期深入开展CD83蛋白及CD83抗体的免疫抑制特性研究提供支持.
文献关键词：
CD83重组蛋白;原核表达;包涵体复性;多克隆抗体
中图分类号：
作者姓名：
马宁;李兴杰;姜鸿宇;徐国锋;王星;张宗德
作者机构：
西南医科大学附属医院炎症与变态反应实验室,泸州646000;西南医科大学基础医学院,泸州646000
文献出处：
引用格式：
[1]马宁;李兴杰;姜鸿宇;徐国锋;王星;张宗德-.CD83重组蛋白的原核表达、复性纯化及多克隆抗体制备)[J].中国免疫学杂志,2022(20):2506-2511
A类：
TOP10F,SKL,QuickAntibody,Arg133
B类：
CD83,重组蛋白,原核表达,多克隆抗体制备,表达系统,结构域,最佳条件,解变,GST,亲和层析,层析纯化,免疫佐剂,反应活性,重组质粒,pGEX,2T,Met1,获得最佳,诱导条件,2mmol,LIPTG,效价,白及,免疫抑制,包涵体复性
AB值：
0.237858
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