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抗SARS-CoV-2 N蛋白单克隆抗体的制备与鉴定
文献摘要：
目的 制备针对严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)核衣壳蛋白(N)的单克隆抗体(mAbs)并鉴定其生物学特性.方法 利用大肠杆菌原核表达重组SARS-CoV-2 N蛋白,通过杂交瘤技术将小鼠骨髓瘤细胞SP2/0与经重组蛋白免疫的BALB/c小鼠的脾细胞进行融合,采用间接ELISA法和有限稀释法筛选出阳性杂交瘤细胞株,并鉴定其亚型,腹水法制备mAbs,Protein G亲和柱纯化后通过SDS-PAGE、间接ELISA和Western blot检测其纯度、效价及特异性.结果 获得5株能稳定分泌抗SARS-CoV-2 N蛋白mAbs的杂交瘤细胞株,分别命名为N1～5.通过腹水法制备获得5个mAbs,亚型鉴定结果显示1个为IgG2a?κ型、4个为IgG1?κ型,其效价均达到2×104以上.Western blot结果表明5个mAbs都能与重组SARS-CoV-2 N蛋白结合.结论 通过杂交瘤技术成功制备了5个能特异性识别重组SARS-CoV-2 N蛋白的mAbs,为开发免疫诊断试剂奠定了基础.
文献关键词：
严重急性呼吸综合征冠状病毒2;核衣壳蛋白;单克隆抗体;免疫学检测
中图分类号：
作者姓名：
刘江丽;李盈盈;王佳雯;许喻鈞;张艳;黄江涛;胡祖权;曾柱
作者机构：
贵州医科大学生物与工程学院贵州省感染免疫与抗体工程特色重点实验室/生物与医学工程重点实验室,贵阳550025;贵州医科大学省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室,贵阳550025
文献出处：
引用格式：
[1]刘江丽;李盈盈;王佳雯;许喻鈞;张艳;黄江涛;胡祖权;曾柱-.抗SARS-CoV-2 N蛋白单克隆抗体的制备与鉴定)[J].安徽医科大学学报,2022(03):429-432,437
A类：
B类：
SARS,CoV,单克隆抗体的制备,严重急性呼吸综合征冠状病毒,核衣壳蛋白,mAbs,生物学特性,大肠杆菌,原核表达,杂交瘤技术,骨髓瘤细胞,SP2,重组蛋白,BALB,脾细胞,有限稀释,稀释法,杂交瘤细胞株,腹水,水法,Protein,亲和柱,SDS,PAGE,blot,效价,N1,IgG2a,IgG1,蛋白结合,特异性识别,免疫诊断,诊断试剂,免疫学检测
AB值：
0.298617
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