典型文献
高中综合实验设计——以"表达和纯化红色荧光蛋白标记的类弹性蛋白"为例
文献摘要：
以类弹性蛋白(elastin-like polypeptide,ELP)作为非色谱纯化标签,分离纯化红色荧光蛋白 mCherry.ELP 与△ I-CM(intein cleavage mutant)的 N 端连接,mCherry 片段与△I-CM的C端连接,在ELP的N端插入GFP片段,用于检测蛋白纯度.采用低温诱导的方式实现重组蛋白在大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中可溶性表达.可逆相变循环,分离纯化融合蛋白GFP-ELP-IN-mCherry,通过改变温度和pH诱导内含肽自剪切,再利用ELP的特性去除GFP-ELP-IN标签,得到目的蛋白mCherry.学生通过本实验可掌握蛋白质分离纯化技术,提高了动手实践的能力.
文献关键词：
类弹性蛋白;内含肽;生物工程;红色荧光蛋白
中图分类号：
作者姓名：
张蕾
作者机构：
徐汇中学 上海 200030
文献出处：
引用格式：
[1]张蕾-.高中综合实验设计——以"表达和纯化红色荧光蛋白标记的类弹性蛋白"为例)[J].生物学通报,2022(04):46-49
A类：
类弹性蛋白,intein
B类：
综合实验设计,红色荧光蛋白,elastin,like,polypeptide,ELP,色谱纯化,纯化标签,mCherry,CM,cleavage,mutant,GFP,蛋白纯度,重组蛋白,大肠杆菌,Escherichia,coli,BL21,DE3,可溶性表达,融合蛋白,IN,变温,内含肽,目的蛋白,蛋白质分离,分离纯化技术,动手实践,生物工程
AB值：
0.336072
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