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Loop结构引入半胱氨酸对木聚糖酶XynASP热稳定性的影响
文献摘要:
为了探究Loop结构引入半胱氨酸对GH11家族木聚糖酶热稳定性的影响,以溶糖曲霉(Aspergillus saccharolyticus)JOP 1030-1木聚糖酶XynASP Loop结构为研究对象,通过定点突变技术,将第95位点天冬酰胺(Asn)突变成半胱氨酸(Cys),获得突变体XynN95C,并在大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中诱导表达.酶学性质分析结果表明,突变体XynN95C最适温度为50℃,酶活性半衰期t1/240℃为38 min,相比野生型XynASP分别提高了5℃、18 min,最适pH从6.0降至5.0.另外,XynN95C的金属离子耐受性较强,经Fe3+处理1 h,相对酶活性为93.9%,较野生型(65.9%)明显提高.由此得出,在Loop结构引入半胱氨酸可有效提高木聚糖酶的热稳定性,这为GH11家族木聚糖酶的热稳定性改造又提供一新思路.
文献关键词:
木聚糖酶;热稳定性;定点突变;半胱氨酸;Loop结构
中图分类号:
作者姓名:
陈康太;杨思文;刁梦月;王宵宵;郭双;李恩中;李同彪
作者机构:
黄淮学院生物与食品工程学院,河南驻马店463000
文献出处:
引用格式:
[1]陈康太;杨思文;刁梦月;王宵宵;郭双;李恩中;李同彪-.Loop结构引入半胱氨酸对木聚糖酶XynASP热稳定性的影响)[J].中国酿造,2022(10):106-112
A类:
XynASP,saccharolyticus,JOP,XynN95C
B类:
Loop,木聚糖酶,热稳定性,GH11,曲霉,Aspergillus,过定点,定点突变技术,天冬酰胺,Asn,Cys,突变体,大肠杆菌,Escherichia,coli,BL21,DE3,诱导表达,酶学性质分析,半衰期,t1,野生型,金属离子,耐受性,Fe3+
AB值:
0.231201
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