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基于RT-ddPCR技术的食品中诺如病毒定量检测
文献摘要：
目的:构建基于逆转录微滴式聚合酶链式反应(reverse transcriptase droplet digital polymerase chain reaction,RT-ddPCR)技术的食品中诺如病毒(norovirus,NoV)定量检测方法.方法:筛选引物探针,建立并优化GI、GII型NoV和MS2噬菌体一步法RT-ddPCR检测体系,确定特异性.利用NoV RNA标准物质和MS2噬菌体RNA确认RT-ddPCR检测体系的定量限、准确度和重复性.制备人工阳性样品,分析MS2噬菌体对定量结果的影响.结果:3个RT-ddPCR检测体系具有良好的特异性、准确度和重复性,NoV RT-ddPCR检测体系的定量限包含104～100 拷贝/μL 5个数量级,MS2噬菌体RT-ddPCR检测体系定量限与NoV相当,添加与不添加MS2噬菌体的人工阳性样品的定量结果无显著差异(P≥0.05).结论:NoVRT-ddPCR检测体系可准确定量NoVRNA,MS2噬菌体不影响定量结果,可作为过程控制的模式病毒被添加到食品中,指示回收率,计算食品中NoV实际载量.
文献关键词：
逆转录微滴式数字聚合酶链式反应;诺如病毒;MS2噬菌体;回收率
中图分类号：
作者姓名：
徐蕾蕊;李丹;汪琦;马丹;魏咏新;魏海燕;赵晓娟;张西萌;曾静
作者机构：
中国海关科学技术研究中心,北京 100026
文献出处：
引用格式：
[1]徐蕾蕊;李丹;汪琦;马丹;魏咏新;魏海燕;赵晓娟;张西萌;曾静-.基于RT-ddPCR技术的食品中诺如病毒定量检测)[J].食品科学,2022(20):313-320
A类：
NoVRT,NoVRNA,逆转录微滴式数字聚合酶链式反应
B类：
ddPCR,诺如病毒,病毒定量,定量检测,reverse,transcriptase,droplet,digital,polymerase,chain,reaction,norovirus,引物,物探,GII,MS2,噬菌体,一步法,检测体系,标准物质,定量限,拷贝,数量级,果无,准确定量,过程控制,载量
AB值：
0.22066
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