典型文献
基于多重荧光定量PCR技术快速检测桶装水中大肠埃希氏菌和铜绿假单胞菌
文献摘要:
目的:建立大肠埃希氏菌(Escherichia coli,E.coli)和铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,P.aeruginosa)多重荧光定量PCR检测方法,用于桶装水中E.coli和P.aeruginosa的同时检测.方法:根据国家生物技术信息中心(National Center for Biotechnology Information,NCBI)数据库中uidA和gyrB基因序列设计引物和探针,优化体系退火温度,构建多重荧光定量PCR检测体系,评价方法特异性、灵敏度、重复性和回收率,同时将该方法用于检测桶装水中的E.coli和P.aeruginosa.结果:多重荧光定量PCR能够同时检测E.coli和P.aeruginosa,方法检测周期短,从核酸提取到完成PCR扩增只需要2.0 h.方法 检测灵敏度高,E.coli和P.aeruginosa的检测限均为102 CFU·mL-1,且扩增效率高、线性范围宽、标准曲线具有良好的线性相关性;组内重复性好,16组扩增数据的变异系数在0.58%~2.34%,均小于5%;方法 特异性强,能够准确区分检测各种非目标菌,且引物和探针之间不存在交叉扩增;对高浓度目标菌回收率均在70%以上,且能够用于桶装水目标菌的加标检测.结论:该方法检测性能优越,能够同时、快速、灵敏、准确的检测桶装水中的E.coli和P.aeruginosa.
文献关键词:
桶装水;大肠埃希氏菌;铜绿假单胞菌;多重检测
中图分类号:
作者姓名:
龙慧;帅淑芬;龙永艳;王伟;吴葵;钟淙
作者机构:
南昌市疾病预防控制中心,江西 南昌 330038
文献出处:
引用格式:
[1]龙慧;帅淑芬;龙永艳;王伟;吴葵;钟淙-.基于多重荧光定量PCR技术快速检测桶装水中大肠埃希氏菌和铜绿假单胞菌)[J].现代食品,2022(23):180-184,188
A类:
uidA
B类:
快速检测,桶装水,大肠埃希氏菌,铜绿假单胞菌,Escherichia,coli,Pseudomonas,aeruginosa,同时检测,生物技术,信息中心,National,Center,Biotechnology,Information,NCBI,gyrB,基因序列,序列设计,引物,优化体系,退火温度,检测体系,法特,周期短,核酸提取,取到,检测灵敏度,灵敏度高,检测限,CFU,线性范围宽,标准曲线,线性相关性,分检,目标菌,够用,检测性能,性能优越,多重检测
AB值:
0.291073
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