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聚合酶链式反应技术快速检测原料乳中荧光假单胞菌
文献摘要：
目的 利用聚合酶链式反应技术(polymerase chain reaction,PCR)技术建立一种快速、准确检测原料乳中最常见有害嗜冷微生物荧光假单胞菌的方法.方法 以荧光假单胞菌蛋白酶基因aprX为检测靶标,设计特异性PCR简并引物,建立原料乳中荧光假单胞菌PCR检测体系,对该体系的特异性及检出限进行评价.结果 筛选到特异性引物F3:5'-WSNGGNGGNGAYTTYCAYATGAC-3';R3:5'-RTCRTTNCCNCCNCCRTCCC-3',建立了最佳PCR检测体系:引物浓度0.5μmol/L、Taq DNA聚合酶添加量0.4μL、dNTPs浓度0.16 mmol/L、Mg2+浓度1.6 mmol/L,退火温度56.4℃,扩增35个循环.此检测方法对荧光假单胞菌具有特异性,检出限为2.57×103 CFU/mL.结论 本方法操作简便,特异性强,适用于快速检测原料乳中的荧光假单胞菌.
文献关键词：
嗜冷菌;荧光假单胞菌;原料乳;聚合酶链式反应技术
中图分类号：
作者姓名：
步雨珊;乔文君;黄冬成;刘银雪;公丕民;刘同杰;张兰威;易华西
作者机构：
中国海洋大学食品科学与工程学院, 青岛 266000;黑龙江大三源乳品机械有限公司, 哈尔滨 150001
文献出处：
引用格式：
[1]步雨珊;乔文君;黄冬成;刘银雪;公丕民;刘同杰;张兰威;易华西-.聚合酶链式反应技术快速检测原料乳中荧光假单胞菌)[J].食品安全质量检测学报,2022(15):4766-4772
A类：
嗜冷微生物,WSNGGNGGNGAYTTYCAYATGAC,RTCRTTNCCNCCNCCRTCCC
B类：
聚合酶链式反应技术,快速检测,原料乳,荧光假单胞菌,polymerase,chain,reaction,酶基因,aprX,检测靶标,简并引物,检测体系,检出限,特异性引物,F3,R3,Taq,dNTPs,Mg2+,退火温度,CFU,嗜冷菌
AB值：
0.23816
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