目的 评价人泛素特异性蛋白酶42(ubiquitin-specific protease 42,USP42)在不同肿瘤组织中的表达水平,并构建其shRNA干扰重组质粒.方法 通过网络数据库GEPIA和Ualcan分析USP42在不同肿瘤组织中的表达水平.以人USP42 mRNA为靶序列设计合成含有shRNA序列的寡核苷酸,克隆至真核表达载体pGPU6/Neo,构建重组质粒USP42-shRNA.采用Neofect? DNA转染试剂将重组质粒转染至人结肠癌细胞HCT116(干扰组),同时设对照组(转染NC-shRNA),Western blot法检测USP42表达的干扰效果,Transwell小室试验检测USP42对结肠癌细胞迁移和侵袭功能的影响.结果 经GEPIA和Ualcan数据库分析发现,USP42在胆管癌、胃癌、胸腺癌和结肠癌等肿瘤组织中呈高表达.测序鉴定证明重组质粒USP42-shRNA构建正确.与对照组比较,干扰组HCT116细胞中USP42蛋白表达水平明显降低(t=16.97,P＜0.001),且能显著抑制HCT116细胞的侵袭和迁移能力(t分别为4.974和7.787,P＜0.01).结论 USP42可能在多种肿瘤的发生发展中发挥重要作用.建立的重组质粒USP42-shRNA可在HCT116细胞中有效干扰USP42的表达,并能抑制肿瘤细胞的侵袭和迁移.

泛素特异性蛋白酶42;shRNA序列;HCT116细胞;细胞迁移;细胞侵袭

山西医科大学生物化学与分子生物学教研室,山西太原030001

[1]郭紫婵;魏媛;王秀丽;赵蓉;王晓霞-.人泛素特异性蛋白酶42在肿瘤组织中的表达及其shRNA干扰重组质粒的构建)[J].中国生物制品学杂志,2022(11):1338-1341

USP42,Neofect

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