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鼠疫耶尔森菌YopT突变体对干扰素β表达的调控
文献摘要：
目的 构建鼠疫耶尔森菌效应蛋白YopT-F296A、YopT-G298A、YopT-H303A、YopT-Y304F、YopT-F296A-G298A和YopT-H303A-Y304F 6种突变体的真核表达载体,并检测6种突变体对干扰素β(IFN-β)表达的调控.方法 以pCMV-Myc-YopT为模板,通过PCR技术分别扩增含有6种突变位点在内的yopT片段.扩增片段经核酸内切酶切割后连接到pCMV-Myc载体中构成重组质粒.重组质粒分别转染HEK293T细胞,免疫印迹检测表达水平,同时通过荧光素酶报告基因技术检测YopT及其6种突变体对IFN-β表达的影响.结果 6种yopT突变体重组质粒均在真核细胞中成功表达,并发现YopT及其6种突变体均能抑制IFN-β报告基因表达.YopT-C139R对IFN-β的表达没有明显抑制作用.结论 YopT 139位是影响IFN-β表达的关键位点,而YopT的296、298、303和304位不是影响IFN-β表达的关键位点.
文献关键词：
鼠疫耶尔森菌;YopT;突变体;干扰素β;真核表达;荧光素酶报告基因
中图分类号：
作者姓名：
焉秋林;李靖飞;张小鹃;董颖;常桂娟;李同据;魏从文
作者机构：
安徽大学物质科学与信息技术研究院,合肥 230601;军事科学院军事医学研究院生物工程研究所,北京 100850;新绎生物医学科技有限公司,河北廊坊 065001
文献出处：
引用格式：
[1]焉秋林;李靖飞;张小鹃;董颖;常桂娟;李同据;魏从文-.鼠疫耶尔森菌YopT突变体对干扰素β表达的调控)[J].军事医学,2022(10):758-762
A类：
YopT,F296A,G298A,H303A,Y304F,yopT,C139R
B类：
鼠疫耶尔森菌,突变体,干扰素,效应蛋白,真核表达载体,IFN,pCMV,Myc,突变位点,核酸内切酶,接到,重组质粒,转染,HEK293T,免疫印迹,荧光素酶报告基因,基因技术,真核细胞,关键位点
AB值：
0.142587
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