典型文献
溶质载体家族成员SLC25A39基因促进乳腺癌细胞线粒体分裂
文献摘要：
目的 构建带Flag标签的人溶质载体家族成员蛋白SLC25A39基因的真核表达载体,在获得Flag?SLC25A39融合蛋白表达后,研究SLC25A39表达对人乳腺癌细胞线粒体稳态的影响.方法 以人乳腺文库为模板采用PCR技术扩增出人SLC25A39的编码区序列,双酶切后将其插入到带Flag标签的pcDNA3.0载体上,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,菌液PCR鉴定阳性的克隆再进行质粒提取,测序正确后将重组质粒与空载体分别转染人乳腺癌细胞ZR75?1.Western印迹鉴定SLC25A39目的基因的表达;Mitotracker对乳腺癌细胞的线粒体进行染色,共聚焦显微镜对线粒体进行观察;Western印迹检测线粒体融合蛋白1(Mfn1)、线粒体分裂蛋白1(Fis1)的表达变化.结果 双酶切鉴定表明,Flag?SLC25A39真核表达载体构建成功;Western印迹验证SLC25A39基因表达成功;激光共聚焦显微镜下观察发现SLC25A39过表达的乳腺癌ZR75?1细胞分裂的线粒体较多;Western印迹证实SLC25A39基因过表达后线粒体分裂蛋白Fis1表达增高,线粒体融合蛋白Mfn1表达减弱.结论 成功构建带Flag标签的SLC25A39基因真核表达载体,该基因可促进人乳腺癌细胞的线粒体分裂,有望成为靶向线粒体治疗乳腺癌的潜在新靶点.
文献关键词：
线粒体溶质载体蛋白SLC25A39;真核表达;人乳腺癌细胞ZR75-1;线粒体分裂
中图分类号：
作者姓名：
符静;薛春源;朱祥;霍楠;丛瑞;孙志佳;亢小峰;闫志风;徐小洁
作者机构：
首都医科大学附属北京朝阳医院,北京 100020;军事科学院军事医学研究院生物工程研究所,北京 100850;解放军总医院第七医学中心,北京 100010
文献出处：
引用格式：
[1]符静;薛春源;朱祥;霍楠;丛瑞;孙志佳;亢小峰;闫志风;徐小洁-.溶质载体家族成员SLC25A39基因促进乳腺癌细胞线粒体分裂)[J].军事医学,2022(04):280-284
A类：
SLC25A39,ZR75
B类：
线粒体分裂,Flag,真核表达载体,融合蛋白表达,人乳腺癌细胞,线粒体稳态,文库,编码区,双酶,pcDNA3,大肠杆菌,DH5,感受态,菌液,重组质粒,空载,转染,目的基因,Mitotracker,检测线,线粒体融合,Mfn1,Fis1,表达变化,表达载体构建,激光共聚焦显微镜,显微镜下,观察发现,细胞分裂,基因过表达,新靶点,溶质载体蛋白
AB值：
0.201872
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