典型文献
PKR基因表达高效阻断Marc-145细胞系建立及其对PRRSV增殖的影响
文献摘要：
研究猪繁殖与呼吸障碍综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)在Marc-145细胞蛋白激酶 R(interferon-induced,double-stranded RNA-activated kinase,PKR)下调表达状态下的感染特性.以 Macr-145 细胞PKR基因序列设计3个shRNA,并设阳性对照,合成后插入pSilencerTM 2.1-U6载体构建重组质粒,与Macr-145细胞PKR+EGFP标签融合表达的重组质粒共转染HEK293细胞,以筛选能下调表达PKR的shRNA,并将该shR-NA重组质粒转染Marc-145细胞,潮霉素B抗性筛选并克隆纯化获得PKR下调表达的细胞系,感染重组病毒PRRSV XZ06a-EGFP,通过检测病毒结构蛋白M与EGFP表达、观察细胞病变等,研究此状态下感染特性.结果显示筛选获得致使PKR下调表达的shRNA,以及稳定表达shRNA、PKR表达降低90％以上的Marc-145细胞系,重组病毒感染后48 h,M蛋白与EGFP表达均受到抑制,且与对照相比,感染后72～96 h,未观察到典型的细胞病变效应,说明在PKR表达受到抑制时,病毒增殖受到明显抑制.本研究通过建立PKR下调表达细胞系与PRRSV感染试验,初步阐明PKR在PRRSV增殖时所发挥的作用,为进一步开展PRRSV与细胞抗病毒固有免疫互作机制研究奠定了基础.
文献关键词：
Marc-145细胞;PKR下调表达;shRNA;PRRSV
中图分类号：
作者姓名：
肖跃强;杨慧;于雪;王文秀;孙培姣;魏凤;唐娜;沈志强
作者机构：
山东省滨州畜牧兽医研究院,山东滨州256600;山东绿都生物科技有限公司,山东滨州256600
文献出处：
引用格式：
[1]肖跃强;杨慧;于雪;王文秀;孙培姣;魏凤;唐娜;沈志强-.PKR基因表达高效阻断Marc-145细胞系建立及其对PRRSV增殖的影响)[J].中国兽医学报,2022(08):1535-1540
A类：
Macr,pSilencerTM,PKR+EGFP,XZ06a
B类：
Marc,细胞系,PRRSV,猪繁殖与呼吸障碍综合征,porcine,reproductive,respiratory,syndrome,蛋白激酶,interferon,induced,double,stranded,activated,kinase,感染特性,基因序列,序列设计,shRNA,阳性对照,U6,载体构建,重组质粒,标签融合,融合表达,共转染,HEK293,质粒转染,潮霉素,抗性筛选,重组病毒,结构蛋白,稳定表达,细胞病变效应,病毒增殖,感染试验,抗病毒,固有免疫,免疫互作,互作机制
AB值：
0.315398
相似文献
机标中图分类号，由域田数据科技根据网络公开资料自动分析生成，仅供学习研究参考。
