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抗H5N1禽流感病毒M1蛋白全人源胞内抗体的制备及纯化
文献摘要：
目的 制备抗H5N1禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)M1蛋白全人源胞内抗体TAT-ScFv M1-mFc,并进行纯化.方法 从pET28(a)-TAT-ScFv M1质粒中通过PCR扩增目的基因片段TAT-ScFv M1,将该片段与表达载体pET32(a)-HisTag-Sumo-mFc 连接,构建重组表达质粒 pET32(a)-HisTag-Sumo-TAT-ScFv M1-mFc,转化大肠埃希菌BL21(DE3)中,IPTG诱导表达目的蛋白.通过金属螯合层析、Sumo酶切及亲和层析等方法对目的蛋白进行纯化,ELISA法检测抗体的亲和活性.结果 重组表达质粒经双酶切及测序鉴定证明构建正确.重组蛋白以包涵体形式表达,相对分子质量约80 000.制备的胞内抗体具有明显结合M1蛋白的活性.结论 获得了具有亲和活性的抗H5N1 AIV M1蛋白的全人源胞内抗体蛋白TAT-ScFv M1-mFc,为进一步开发针对AIV H5N1的抗体药物奠定了基础.
文献关键词：
H5N1禽流感病毒;M1蛋白;全人源抗体;胞内抗体
中图分类号：
作者姓名：
蔄弘扬;孙赫;田园;吴广谋;张国利;邱月;王瑜;张文慧;岳玉环
作者机构：
吉林农业大学生命科学学院,吉林长春130117;中国农业科学院长春兽医研究所生物技术应用研究室,吉林长春130117
文献出处：
引用格式：
[1]蔄弘扬;孙赫;田园;吴广谋;张国利;邱月;王瑜;张文慧;岳玉环-.抗H5N1禽流感病毒M1蛋白全人源胞内抗体的制备及纯化)[J].中国生物制品学杂志,2022(10):1200-1204
A类：
胞内抗体,mFc,pET32,HisTag
B类：
H5N1,禽流感病毒,M1,avian,influenza,virus,AIV,TAT,ScFv,pET28,质粒,目的基因,该片,表达载体,Sumo,重组表达,大肠埃希菌,BL21,DE3,IPTG,诱导表达,目的蛋白,金属螯合,亲和层析,检测抗体,粒经,双酶,重组蛋白,包涵体,相对分子质量,发针,抗体药物,全人源抗体
AB值：
0.281694
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