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靶向甲型流感病毒血凝素蛋白的广谱抗体制备及鉴定
文献摘要：
目的:制备靶向甲型流感病毒血凝素(hemagglutinin，HA)蛋白的广谱抗体FHA3，并对其进行鉴定。方法:依据单链抗体(single-chain antibody fragment，scFv)序列信息，PCR扩增FHA3重链和轻链可变区序列，连入抗体哺乳细胞表达载体pFRT-IgG1κ，构建重组表达质粒pFRT-IgG1κ-FHA3。利用瞬时高效表达系统ExpiCHO以及亲和纯化技术获取抗体蛋白FHA3。ELISA检测FHA3与甲型流感病毒HA的结合。假病毒感染宿主细胞试验检测抗体FHA3的体外中和活性。结果:蛋白质电泳结果显示制备获取了高纯度FHA3。FHA3与甲型流感病毒H1N1 HA、H2N2 HA、H3N2 HA、H5N1 HA、H7N9 HA以及H9N2 HA均识别结合，且呈浓度依赖效应。FHA3具有较好的体外中和活性，在低浓度下(5 μg/ml)能有效阻断H5N1以及H7N9假病毒入侵靶细胞，在0.012 5 μg/ml浓度下能有效阻断H1N1假病毒入侵靶细胞。结论:获得1株具有体外中和活性的靶向甲型流感病毒HA蛋白的广谱抗体。
文献关键词：
甲型流感病毒;血凝素;广谱;中和活性
中图分类号：
作者姓名：
陈楠;柴立辉;陈国江;王晶;乔春霞;李新颖;刘成华;沈倍奋;冯健男;肖鹤
作者机构：
军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所，北京 100850;河南大学抗体药物开发技术国家地方联合工程实验室，开封 475004
文献出处：
引用格式：
[1]陈楠;柴立辉;陈国江;王晶;乔春霞;李新颖;刘成华;沈倍奋;冯健男;肖鹤-.靶向甲型流感病毒血凝素蛋白的广谱抗体制备及鉴定)[J].中华微生物学和免疫学杂志,2022(08):636-641
A类：
FHA3,pFRT,ExpiCHO
B类：
甲型流感病毒,毒血,血凝素,广谱抗,抗体制备,hemagglutinin,单链抗体,single,chain,antibody,fragment,scFv,序列信息,轻链,可变区,连入,哺乳,表达载体,IgG1,重组表达,质粒,高效表达,表达系统,亲和纯化,纯化技术,技术获取,假病毒,宿主,主细胞,试验检测,检测抗体,中和活性,蛋白质电泳,高纯度,H1N1,H2N2,H3N2,H5N1,H7N9,H9N2,ml,病毒入侵,靶细胞
AB值：
0.30535
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